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本实验通过DNA重组技术从一株可中和破伤风毒素的人源单克隆抗体细胞(G6)中扩增出了抗体的VH,VL基因,通过重叠PCR使连接片段与VH,VL连接成单体ScFv。
经测序证实VH,VL为抗体的可变区序列,命名为ScFv-G6。将scFv-G6连接转化PET/26b质粒,构建了抗体的表达载体,命名为PET/26b/ScFv-G6。用这一载体在大肠杆菌中分泌表达,表达产物经Ni-亲和柱纯化后,小鼠试验证实可抵抗破伤风毒素的攻击,表明为中和抗体。具有组织穿透力强,不易过敏,可直接靶向于毒素等特点,适合破伤风的防治,具有重要的应用价值。