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琼脂糖微球是一种生物相容性良好、多孔、亲水、不含带电基团的天然多糖型生物填料，作为层析介质的基质具有不可替代的作用。同时由于琼脂糖含有多羟基，可以通过化学键合得到具有不同功能基团的衍生物。以琼脂糖为基质的层析介质广泛应用于生物大分子的分离纯化，尤其是随着蛋白质组学的快速发展，成为蛋白等生物样品必不可少的分离材料。为此，本文综述了琼脂糖微球的制备，以琼脂糖为基质的各种功能微球的制备，并对琼脂糖类凝胶介质在层析分离方面的应用进行了介绍。