【摘 要】
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目的研究不同亚型巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用。方法实验分为5组:对照组、PMA组、M2组、M1组、通心络组。采用PMA(5μg·L-1)分别联合IL-4(100μg·L-1)
【机 构】
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河北医科大学研究生学院; 国家中医药管理局重点研究室(心脑血管络病); 国家中医药管理局中医络病学重点学科; 河北省络病重点实验室;
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)(2012CB518606)
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目的研究不同亚型巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用。方法实验分为5组:对照组、PMA组、M2组、M1组、通心络组。采用PMA(5μg·L-1)分别联合IL-4(100μg·L-1)、LPS(200μg·L-1)诱导THP-1细胞分别向M2、M1型巨噬细胞极化并给以通心络(TXL,300 mg·L-1)进行干预,采用酶联免疫吸附方法检测其标志分子白介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-仪(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达。取巨噬细胞培养上清作为条件培养基培养内皮细胞,采用流式细胞仪检测内皮细胞凋亡率、蛋白免疫印迹方法检测凋亡相关蛋白(caspase3、bax、bcl-2)的表达。结果与正常组比较,M2组细胞培养上清中IL-10水平升高(P<0.01);M1组细胞培养上清中IL-10水平明显降低,IL-6、TNF-仪水平明显升高(P<0.01);与M1组比较,通心络组细胞培养上清中IL-10水平升高,IL-6、TNF-仪水平下降(P<0.01)。与M2组内皮细胞比较,M1型巨噬细胞细胞培养的内皮细胞凋亡率显著升高(P<0.01),促凋亡蛋白caspase3、bax的表达显著升高(P<0.05,P<0.01),抗凋亡蛋白bcl-2的表达降低(P<0.01),与M1组比较,通心络组内皮细胞的凋亡率显著降低(P<0.01),促凋亡蛋白caspase3、bax的表达降低(P<0.05,P<0.01),抗凋亡蛋白bcl-2的表达升高(P<0.01)。结论通心络可以抑制巨噬细胞向M1型极化。M2型巨噬细胞培养上清对内皮细胞的凋亡无明显影响,M1型巨噬细胞培养上清可以促进内皮细胞凋亡;通心络预培养的M1型巨噬细胞培养上清培养的内皮细胞凋亡率显著下降。
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