【摘 要】
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许多细菌在受到外界环境选择时，为了维持自身新陈代谢的平衡，通过生理和形态的变化进入VBNC状态。目前己有70多种细菌可以进入VBNC状态。VBNC状态的细菌在常规培养基上不能生长繁殖，但是仍能保持其活性。E. co1i0157:H7是一种感染性极强的食源性致病菌，若进入VBNC状态，常规方法不能对其检出，在实际检测中很容易造成漏检，那么将会引起严重的食品安全问题。VBNC状态是指细菌的活的非可培养
【机 构】
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华南理工大学,轻工与食品学院,广州510640 华南理工大学,轻工与食品学院,广州510640;美
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许多细菌在受到外界环境选择时，为了维持自身新陈代谢的平衡，通过生理和形态的变化进入VBNC状态。目前己有70多种细菌可以进入VBNC状态。VBNC状态的细菌在常规培养基上不能生长繁殖，但是仍能保持其活性。E. co1i0157:H7是一种感染性极强的食源性致病菌，若进入VBNC状态，常规方法不能对其检出，在实际检测中很容易造成漏检，那么将会引起严重的食品安全问题。
VBNC状态是指细菌的活的非可培养状态。该文通过低温寡营养诱导E.coliO157:H7进入VBNC状态并在扫描电子显微镜和原子力显微镜下观察其形态变化.选取4和-20℃作为诱导温度,在4℃,E.coliO 157:H7的可培养数一直保持在109 cfu/mL,不能诱导E.coliO157:H7进入VBNV状态;而在-20℃,EcoliO157∶ H7的可培养数逐渐减少,第24天其可培养数为0,连续3天测定后,其可培养数仍为0.以AOAC和DVC法测定经-20℃诱导后总菌数和活菌数分别8.6×108和6.8×105 cfu/mL.利用PMA-PCR检测方法扩增E.coliO157:H7基因rfbE,扩增产物经2％的琼脂糖凝胶电泳产生特异性条带,条带大小为193 bp,确定E.coliO157:H7经低温诱导后进入VBNC状态.扫描电子显微镜观察下VBNC状态的菌体体积骤缩,由短杆状变为圆球状且菌体发生交联聚合.原子力显微镜观察下E.coliO157:H7进入VBNC状态后其步长由8.495变为0.262 nm,偏离基线的程度大幅减少,单位表面积的体积明显减小.-20℃的低温寡营养能够诱导E.coliO157:H7进入VBNC状态,且在VBNC状态下E.coliO157:H7呈现与正常菌体不同的形态.
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