【摘 要】
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目的 阐明miR-181a-5p对巨噬细胞表型转化的作用,并初步探讨其作用机制。方法 培养人白血病单核细胞系THP-1,用PMA将其诱导为静息态的巨噬细胞(Mφ),然后加入LPS和IFN-γ诱导为M1型巨噬细胞或加入IL-4诱导为M2型巨噬细胞；通过Real-time PCR和Western blot方法检测不同表型巨噬细胞中M1型和M2型特异性标志物CD163等mRNA及蛋白表达水平；采用ELI
【机 构】
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中国医科大学药学院药理教研室,辽宁沈阳110122
【出 处】
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2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议
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目的 阐明miR-181a-5p对巨噬细胞表型转化的作用,并初步探讨其作用机制。方法 培养人白血病单核细胞系THP-1,用PMA将其诱导为静息态的巨噬细胞(Mφ),然后加入LPS和IFN-γ诱导为M1型巨噬细胞或加入IL-4诱导为M2型巨噬细胞；通过Real-time PCR和Western blot方法检测不同表型巨噬细胞中M1型和M2型特异性标志物CD163等mRNA及蛋白表达水平；采用ELISA方法检测细胞培养基中CCL22等表型相关分泌因子的含量；应用流式细胞仪和免疫荧光技术检测表面标记物CD86、CD206在不同类型巨噬细胞中的比例；分别利用生物信息学预测巨噬细胞极化通路相关基因与miR-181a-5p的结合能力,并运用荧光素酶报告基因技术分析miR-18 1a-5p与靶基因的结合活性。
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