CREB信号转导通路在心室起搏致心肌电重构的作用机制

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目的通过观察不同起搏部位诱导出心脏记忆的beagle犬模型中对心电图,T波,心脏功能(心超,BNP),心肌结构及信号通路中环磷酸腺苷(cAMP)应答元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases1/2,ERK1/2)、P38分裂原激活的蛋白激酶(P38 mitogen activated protein kinases.P38MAPK)的影响。探讨CREB、ERK1/2、P38MAPK等对起搏致心肌电重构的影响和其可能存在的作用机制,同时探讨不同起搏部位在心肌电重构中的作用。方法取成年雄性beagle犬24只,在DSA下建立beagle犬双心室起搏的动物模型,根据起搏部位不同,分为对照组(n=6),左心室起搏组(n=6),右心室起搏组(n=6)及双心室起搏组(n=6)。植入CRT起搏器的beagle犬,术后1周进行起搏器程控,起搏组开启相应部位的心室起搏,对照组始终关闭起搏器,起搏3周后关闭起搏器;术前和术后4周通过检测多普勒超声心动图、体表心电图、血浆B型利钠肽水平评价不同起搏部位致心肌电重构的影响。术后4周予处死犬,取心脏行心肌病理检查并用Western blot技术对ERK1/2、P38MAPK及CREB的表达进行检测。结果 1.术前及术后4周,4组实验动物,即对照组、左室起搏组、右室起搏组及双室组心率、心脏结构、心超舒张收缩功能及血浆B型利钠肽水平差异无统计学意义(P>0.05)。2.术后4周,对照组、右心室起搏组、左心室起搏组及双心室起搏组心电图Tp-Te间期分别为(60±12)、(92±11)、(91±10)、(79±13)ms,3个起搏组Tp-Te间期均长于对照组(P<0.05),双心室起搏组短于左心室起搏组和右心室起搏组(P<0.05);3.心肌病理切片示4组心肌组织排列整齐,均无心肌细胞的水肿、坏死、钙化、心肌肥大和纤维化及炎性细胞的浸润,未发现心衰细胞等病理。4组术后4周的右心室心肌组织无明显差异。4.Western blot结果显示,对照组(左侧,右侧)、左心室起搏组(左侧,右侧)、右心室起搏组(左侧,右侧)及双心室起搏组(左侧,右侧)磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达水平分别为(1.4±0.1,1.5±0.2)、(2.7±0.4,1.4±0.2)、(1.4±0.1,2.4±0.2)、(1.7±0.1,1.9±0.2),单侧起搏组及双室起搏组起搏侧VS对照组,p-ERK1/2表达升高(P<0.05),单侧起搏组起搏侧VS对侧,其表达升高(P<0.05),双室起搏组VS单侧起搏组起搏侧,其表达降低(P<0.05)。5.对照组(左侧,右侧)、左心室起搏组(左侧,右侧)、右心室起搏组(左侧,右侧)及双心室起搏组(左侧,右侧)磷酸化P38 MAPK(p-P38 MAPK)表达水平分别为(0.5±0.1,0.5±0.1)、(1.9±0.3,0.6±0.1)、(0.6±0.1,1.7±0.2)、(0.9±0.1,1.1±0.1),单侧起搏组及双室起搏组起搏侧VS对照组,p-P38MARK表达升高(P<0.05),单侧起搏组起搏侧VS对侧,其表达升高(P<0.05),双室起搏组VS单侧起搏组起搏侧,其表达降低(P<0.05)。6.对照组(左侧,右侧)、左心室起搏组(左侧,右侧)、右心室起搏组(左侧,右侧)及双心室起搏组(左侧,右侧)磷酸化CREB(p-CREB)表达水平分别为(3.8±0.5,3.6±0.4)、(2.1±0.2,3.6±0.3)、(3.9±0.5,2.0±0.2)、(2.7±0.4,2.6±0.3),单侧起搏组及双室起搏组起搏侧VS对照组,p-CREB表达降低(P<0.05),单侧起搏组起搏侧VS对侧,其表达降低(P<0.05),双室起搏组VS单侧起搏组起搏侧,其表达略升高(P<0.05)。结论 1.通过测量心脏电重构指标Tp-Te间期,发现心室起搏可导致犬心肌的电重构,并能促进心肌ERK1/2及P38MAPK的磷酸化,抑制心肌CREB磷酸化。2,ERK1/2及P38MAPK的磷酸化可能是心肌电重构作用机制之一,而CREB的磷酸化抑制心肌电重构。3.通过双心室起搏组与单心室起搏组起搏组比较,双心室起搏具有减轻心肌电重构的作用。
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