【摘 要】
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白藜芦醇合酶(resveratrolsynthase,RS)是合成白黎芦醇的关键酶.目前控制白黎芦醇合成的白藜芦醇合酶基因已经通过PCR技术从葡萄的叶片中分离出来,并已导入烟草小麦、大麦等
【机 构】
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福建师范大学生物工程学院,福州,350007福州市农业科学研究所,福州,350018农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室,福州,350002
【出 处】
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第八届全国工业生化与分子生物学学术大会
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白藜芦醇合酶(resveratrolsynthase,RS)是合成白黎芦醇的关键酶.目前控制白黎芦醇合成的白藜芦醇合酶基因已经通过PCR技术从葡萄的叶片中分离出来,并已导入烟草小麦、大麦等农作物中,转基因烟草、小麦、大麦都表现出对灰霉病抗性的增强.利用白黎芦醇的特有生物学功能,本实验室通过分离克隆花生cDNA及DNA中的白藜芦醇合酶基因,构建植物表达载体,并将它导入植物,试图获得具有多种保健作用的植物新品种.本课题组在克隆花生白藜芦醇合酶cDNA,阐明其cDNA序列(结果已登录GenBank,登录号为AY170347)的基础上,通过PCR方法从花生基因组DNA中分离出白黎芦醇合酶基因,将其克隆到pMD18-T和pBluescriptIIKS(+)载体并测序,获得长1537bp的片段.本文还对该酶基因组DNA序列和cDNA序列以及已报道的白藜芦醇合酶DNA序列的进行比较,指出该基因组DNA的内含子,及其核苷酸和氨基酸与其它芪合酶序列的同源性和相似性.以花生基因组DNA为模板,设计的5端和3端引物进行PCR扩增,可见明显的大小约为1700bp的DNA泳带.结果表明以同样引物扩增,花生基因组DNA与cDNA所扩增的条带(1200bp)大小不同,相差500bp左右,结果见图1.初步判定基因组DNA的RS基因中存在内含子.
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