双孢蘑菇PPO基因的克隆与特性分析

来源 :第二届全国食用菌中青年专家学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zh9958
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设计简并引物克隆了PPO基因cDNA片段,并根据获得的序列信息用cDNA末端快速扩增(RACE)方法从双孢蘑菇中克隆到了两个PPO同源基因的cDNA全长,将其命名为AbPPO3和AbPPO4,分别编码576和611个氨基酸,具有多酚氧化酶的Cu结合保守结构域.同源性分析表明,AbPPO3编码的氨基酸序列与其他真菌PPO同源蛋白的相似性约为21~50%,AbPPO4与其他真菌PPO蛋白的相似性约为20~63%. 系统进化树分析表明,AbPPO3,AbPPO4和已克隆的双孢蘑菇AbPPO2具有较近的进化关系.半定量分析表明.在双孢蘑菇子实体的不同发育时期,AbPPO3和AbPPO4在子实体刚开始形成时表达量最低,在茶杯期即商品菇开始采摘时表达量上升,至子实体完全成熟时即大开伞期表达量一直很高。双孢蘑菇4℃储藏时.AbPPO3和AbPPO4在第1天可检测到微量表达,第2~4天表达均较强,之后至第7天表达量下降.这表明,AbPPO3和AbPPO4可能与双孢蘑菇褐变相关.
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