即时定量聚合酶链反应法定量测定乙肝病毒DNA

来源 :2010年第五次中美医院药学服务高级论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiao4869
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目的:建立实时定量PCR法测定血清样品中乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)含量。方法:用PEG-裂解-煮沸法从血清中提取核酸,制作成标准浓度曲线后,对100份患者样本进行实时荧光定量分析,并与ELISA(酶标法)结果作比较,再与CAP-CTM法进行比较。结果:用SPSS(v.16)软件进行统计分析,得线性回归方程Y=-3.212X+44.90;r2=0.9980;日内、日间平均误差为RSD<2.15[%];最低检测限是400copies/mL(拷贝数):该法测得患者HBV DNA的浓度与ELISA测出样品阳性发生率呈正相关,再与CAP-CTM(化学发光法)作配对t检验,二者无显著性差异。结论:新建的PCR检测法敏感度高,重现性好,线性范围较广,可用于进行临床血清样本中HBV DNA的定量检测,这对评估HBV患者诊治效果有帮助。
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