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【目的】检测怀孕肉牛的早孕因子(Early pregnancyfactor,EPF)活性，并对其进行分离纯化。【方法】采集妊娠1～9个月的肉牛血样，并进行妊娠诊断，通过玫瑰花环抑制实验(RosetteInhibition Test,RIT)检测其EPF活性。对有活性的血样进行层析，分离纯化EPF，对纯化产物进行SDS-PAGE检测，并测定其等电点。【结果】怀孕牛和未怀孕牛血清的玫瑰花环抑制滴度差异显著(P<0．05)，纯化出的EPF具有活性。【结论】通过RIT检测EPF活性可以鉴定肉牛的妊娠状态，肉牛EPF蛋白的分子质量为53．6ku，等电点为6．8。