【摘 要】
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恒定自然杀伤T （invariant nature killer T,iNKT）细胞作为连接固有和适应性免疫的特殊细胞在自身免疫疾病中发挥重要作用。我们前期研究证实,活动期类风湿关节炎（RA）患者iNKT细胞频率和体外增殖能力明显低于健康人;RA小鼠iNKT细胞频率降低,胸腺iNKT1亚群比例增高,iNKT2亚群比例下降;RA小鼠胸腺编码iNKT细胞发育分化的关键转录因子早幼粒细胞白血病锌指蛋白（
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第十四届全国免疫学学术大会论文摘要汇编
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恒定自然杀伤T （invariant nature killer T,iNKT）细胞作为连接固有和适应性免疫的特殊细胞在自身免疫疾病中发挥重要作用。我们前期研究证实,活动期类风湿关节炎（RA）患者iNKT细胞频率和体外增殖能力明显低于健康人;RA小鼠iNKT细胞频率降低,胸腺iNKT1亚群比例增高,iNKT2亚群比例下降;RA小鼠胸腺编码iNKT细胞发育分化的关键转录因子早幼粒细胞白血病锌指蛋白（PLZF）等基因启动子区组蛋白H3K27和H3K4甲基化修饰存在异常。过继输注具有特定表型和功能的iNKT细胞纠正了RA小鼠脾脏Th1/Th2/Th17亚群的失衡,有效改善了RA小鼠临床症状。那么,过继输注iNKT细胞是否会影响RA小鼠胸腺iNKT细胞频率及亚群的变化?目的研究过继输注脾脏来源的具有特定表型和功能的iNKT细胞对RA小鼠胸腺iNKT亚群失衡的影响,并初步探讨其作用机制。方法诱导分离纯化高表达GATA-3、分泌IL-4的iNKT2细胞;经尾静脉过继输注RA小鼠,同时设α-半乳糖神经酰胺（α-Galcer）对照组在体激活iNKT细胞;在不同时间点观察RA临床症状,FCM检测小鼠胸腺iNKT细胞频率及亚群变化;WB检测小鼠胸腺PLZF、T淋巴细胞上的T盒（T-bet）及组蛋白去甲基化酶（UTX）蛋白的表达;RT-PCR检测小鼠胸腺PLZF、T-bet mRNA的转录;ChIP-PCR检测Zbtb16（编码PLZF）和Tbx21（编码T-bet）基因启动子区组蛋白甲基化修饰水平。结果1、细胞治疗降低了RA小鼠胸腺iNKT1和iNKT17亚群的比例,提高了iNKT2亚群的比例;提升了胸腺DP细胞PLZF的表达,降低iNKT细胞T-bet的表达,且细胞治疗组显著高于α-Galcer组;2、细胞治疗降低了胸腺DP细胞Zbtb16和iNKT细胞Tbx21基因启动子区H3K27me3和H3K4me3修饰水平,且降低H3K4me3修饰水平的作用细胞治疗组尤为显著。3、细胞治疗上调了RA小鼠胸腺淋巴细胞中UTX的表达。结论iNKT2细胞过继治疗可能以直接或间接的方式通过影响RA小鼠胸腺iNKT发育分化关键转录因子基因启动子区组蛋白甲基化修饰水平,从而纠正RA小鼠胸腺iNKT亚群的失衡。研究结果为以iNKT细胞为靶标的RA治疗提供了新的依据和思路。
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