目的:抑癌基因p16是肿瘤基因治疗最常用的治疗基因之一,通过腺病毒载体介导p16基因表达引发肿瘤细胞凋亡在多种p16基因失活的肿瘤细胞系中都得到了证实。研究表明,p16在人原发性肝细胞癌中存在高频率失活。因此, 本研究通过观察外源性p16基因经AFP核心启动子驱动表达后对AFP阳性肝癌细胞的影响,以探讨p16基因在肝癌靶向基因治疗中应用的可行性。方法:将外源性p16基因置于人α-甲胎蛋白核心启动子AF0．3下游,构建了携带p16基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad—AFP—p16,感染肝癌细胞后, 应用MTT比色法、Western Blotting、DNA片段化分析、流式细胞术分析等方法在体外研究外源性p16基因表达对细胞生长的影响。小鼠皮下接种感染重组腺病毒的鼠肝癌细胞 H22,观察病毒对肝癌细胞体内成瘤性的影响。结果:感染 Ad—AFP—p16的肝癌细胞高效表达P16蛋白,MTT结果显示细胞生长受到明显抑制,DNA片段化分析和流式细胞术分析证实p16能诱导肝癌细胞发生显著凋亡。感染Ad— AFP—p16的肝癌细胞体内成瘤性受到明显抑制。结论: AFP启动子驱动p16基因表达可以诱导肝癌细胞发生凋亡。