肾上皮细胞癌(RCC)是最常见的肾脏恶性肿瘤之一,全球范围内每年大约有15000人死于肾上皮细胞癌[1]。最近的研究表明其发病率和死亡率都呈上升趋势[2,3]。其中RCCs的一个最常见的子类型是肾透明细胞癌(ccRCC),占所有RCCs的70%-80%。ccRCC有很高的死亡率,30%的病人会有转移[4],对肾透明细胞癌发展进程中的关键蛋白的研究对于临床治疗ccRCC有一定的指导作用。我们对临床ccRCC病人样本进行蛋白质组学分析,发现GIT2、CA9等蛋白在肾癌组织中较癌旁组织有明显高表达。我们利用人透明细胞癌细胞系786-O、769-P,分别构建了GIT2、CA9的敲低和过表达细胞系。我们发现GIT2、CA9敲低的细胞系生长速度均变慢。我们对GIT2敲低细胞系做了蛋白质组学分析及代谢组学分析,发现TCAcycle相关蛋白及代谢产物表达量上调,糖酵解相关蛋白及代谢产物表达下降。在敲低细胞系中TCAcycle可能被激活,我们猜想可能是由于线粒体合成增加,因此利用流式细胞术、western、qPCR等实验手段测定GIT2敲低细胞系的线粒体合成,确实发现敲低细胞系线粒体合成明显增多(图一)。之后我们希望找到GIT2敲低细胞系中是如何调节线粒体合成增加的,我们利用过表达细胞系pull down实验,发现14-3-3与GIT2有结合,我们推测GIT2协助14-3-3结合到p-FOXO蛋白上抑制其入核[5],从而降低线粒体合成。CA9蛋白敲低后肾癌细胞系同样线粒体合成增加,同时发现ROS增加,CA9作为目前已知的肾癌的靶点被广泛研究,我们后续会致力于CA9在ccRCC中的作用研究。我们从临床样本出发,从蛋白质组学数据中发现肾癌关键蛋白,在细胞系中通过蛋白质组学、代谢组学等手段研究其对癌细胞发展、代谢等的影响,为临床治疗肾癌提供了一定的理论基础。