应用SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR鉴别TTV1、TTV2方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a715362633
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为建立能够检测输血性传播病毒基因1型和基因2型(TTV1和TTV2)的方法,本研究根据TTV1与TTV2基因的非编码区域(UTR)序列差异,设计了2对特异引物,建立了鉴别TTV1、TTV2的SYBR-Gree Ⅰ实时荧光PCR方法。对该方法分别进行了特异性、敏感性及重复性的检验。结果表明:本方法以其重组质粒建立的标准曲线相关系数为99%;可以同时鉴别TTV1.TTV2,而且在检测PCV2、PRRSV阳性样品时,均呈阴性,表明该方法具有良好的特异性;应用该方法的最低检出量为10拷贝数/μL;重复试验结果显示,TTV1组内、组间变异系数分别为0.14%、0.74%;TTV2组内、组间变异系数均为0.13%。应用该方法检测现地采集的189份样品,其中,TTV1阳性率32.3%,TTV2阳性率6.3%,TTV1、TTV2混合感染的阳性率为28.6%。TTV检测方法的建立为猪群TTV的流行病学调查提供了有效的手段。
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