SHCBP1通过调控EMT促进人滑膜肉瘤细胞HS-SY-Ⅱ迁移及侵袭的作用研究

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ngnza
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  目的:探讨SHC SH2 结构域连接蛋白1(SHCBP1)是否通过上皮-间充质转化(EMT)影响人滑膜肉瘤细胞的侵袭及迁移能力.方法:利用荧光定量PCR来检测人滑膜肉瘤细胞 HS-SY-Ⅱ、YamatoSS、AskaSS 以及SW982中SHCBP1的表达水平; 设计并合成靶向SHCBP1的特异性shRNA,通过脂质体转染法转染SHCBP1表达最高的滑膜肉瘤细胞HS-SY-Ⅱ以构建稳定低表达SHCBP1细胞株,通过 Western blot 法检测和定量 PCR来验证 shRNA 的干扰效率; 通过 transwell 法检测干扰后细胞的迁移及侵袭能力,Western blot 法检测 EMT 相关指标 Ecadherin和 N-cadherin 以及其上游信号分子 Snail 和 WNT-5a 的变化.结果:SHCBP1-shRNA 转染后,能够有效抑制HS-SY-Ⅱ细胞中SHCBP1的表达; Transwell 法结果显示,SHCBP1 干扰组细胞侵袭及迁移能力显著低于阴性对照组(P < 0.001).Western blot 法检测结果发现,SHCBP1 干扰组细胞的 E-cadherin 表达增加,N-cadherin 的表达降低; 此外,SHCBP1 干扰组细胞的 Snail 以及 WNT-5a 表达较对照组显著下降.结论:运用 RNA 干扰技术能够有效沉默 HS-SY-Ⅱ细胞的 SHCBP1 基因,并诱导其迁移侵袭能力的下降,其可能的机制是通过调节 EMT 的上游信号分子Snail、WNT-5a 的表达来调控 EMT,从而影响滑膜肉瘤细胞的迁移及侵袭.提示SHCBP1可能在滑膜肉瘤HS-SY-Ⅱ 细胞的发生发展中起重要作用,抑制 SHCBP1的表达可能成为一种治疗滑膜肉瘤的新方法.
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