【摘 要】
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本研究利用RT-PCR 与RACE-PCR 方法克隆获得一个福寿螺(Pomacea canaliculata)CYP450基因cDNA,序列全长为2302bp,含一个1512 bp 的开放阅读框(ORF),可编码503 个氨基酸残基.该编码蛋白含有CYP4 家族成员的保守特征序列,螺旋K(E--R--P),氧结合结构区(AG--T),血红素结合区(PF--G---C-G--F)等保守区域.同源性分
【机 构】
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中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州510380;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306
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本研究利用RT-PCR 与RACE-PCR 方法克隆获得一个福寿螺(Pomacea canaliculata)CYP450基因cDNA,序列全长为2302bp,含一个1512 bp 的开放阅读框(ORF),可编码503 个氨基酸残基.该编码蛋白含有CYP4 家族成员的保守特征序列,螺旋K(E--R--P),氧结合结构区(AG--T),血红素结合区(PF--G---C-G--F)等保守区域.同源性分析,该基因编码的蛋白与其它相近物种CYP4 基因氨基酸序列同源性均达42％以上,同源性最高的是光滑双齐螺(Biomphalaria glabrata)的CYP4F6-like(GenBank 登录号：XP01308472),同源性达49％.荧光定量PCR 检测性别、组织差异对福寿螺CYP4F6-like 表达的影响,结果表明性别对福寿螺中肠组织CYP4F6-like 基因表达有极显著影响(P<0.01).同一性别螺体中鳃与其它组织表达差异性极显著(P<0.01).雄性中表达量最丰富是鳃,约是表达水平最小的组织心的35 倍；而雌螺中这一比值约为17 倍.
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为了研究鱼类低温下分子调控机制,及其与活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)之间的关系.本实验对斑马鱼ZF4 细胞进行不同程度的低温胁迫(18℃ 和10℃),监测其在不同低温胁迫时间下(1d、3d 和5d)ROS 的变化以及压力相关蛋白的表达情况.结果显示1)DCFH-DA 探针法表明在低温胁迫作用下,细胞内ROS 含量增加.细胞内ROS 上升水平与外界胁迫压力成正相关：
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应用碳、氮稳定同位素技术对2014 年11 月至2015 年8 月所采集的长江口主要渔业生物进行了分析.对32 种鱼类,12 种无脊椎动物进行了研究,研究结果显示：鱼类的δ15N 值范围为9.26‰～15.45‰,跨度为6.19‰,δ13C 值范围为-29.78‰～-14.25‰,相差15.53‰,计算出相应的营养级范围为3.37～5.82,属于3 个营养级.无脊椎动物δ15N 范围为7.73‰～
冰冻海洋中生存的南极eelpout(Lycodichthys dearborni)体内能合成高浓度的Ⅲ型抗冻蛋白(AFP Ⅲ).为了寻找新的AFP Ⅲ基因,构建了L.dearborni肝脏cDNA文库.通过斑点杂交筛选此文库,发现一个287 kb的cDNA克隆 LD12.序列分析采用DNAssist 2.0和ClustalX 1.8软件.结果显示,LD12分子由12个串联重复的片段构成,每一个片段
为了研究低温胁迫下抗冻基因LD4 对细胞应激颗粒(stress granules)形成的影响，以便为鱼类耐寒育种提供理论依据.我们从南极鱼Lycodichthys dearborn(LD)的多聚AFPⅢ 基因LD12 CDNA 中克隆得到AFPⅢ 蛋白四聚体LD4.将其转染到HeLa 细胞中，通过反转录PCR(RT-PCR)、Western Blot 检测到目的基因LD4 在细胞中成功表达.进一步
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