动物微生物学的“五结合”与“五提高”教学法

来源 :中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BlueWindow
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动物微生物学是一门与兽医临床、家畜传染病、社会、历史和生命发展前沿密切联系的学科."五结合"与"五提高"教学法,就是基于这种联系,结合这些因素去讲授兽医微生物的教学方法.这种方法,可激发学生学习微生物课程的积极性,加深他们对所学知识的理解与记忆,增强学生研究与探索微观世界兴趣与能力,为培养高素质和创新人材打基础.
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猪链球菌2型引起的链球菌病是一种重要的人兽共患病,猪链球菌2型的生物学特性与其它类型的链球菌即有共同之处,又有其自己的特点.本试验对猪链球菌2型的形态结构、培养特征、生化特性、对动物的致病性进行了系统研究,并建立了对猪链球菌2型及其毒力因子进行检测的二重PCR方法,其敏感性达4×102 CFU/ml.为猪链球菌2型的鉴定以及猪链球菌2型引起的链球菌病的诊断和免疫预防的研究打下了基础.
临床分离的猪链球菌经随机扩增多态性DNA分析,挑选出四株毒力强、免疫原性好且遗传距离较远的猪链球菌作为疫苗株,研制出猪链球菌病氢氧化铝胶多价灭活疫苗.该疫苗对实验小鼠安全性好,无不良反应.实验室的小鼠免疫效力试验证实该苗的保护率为100%,优于单价灭活疫苗和猪链球菌病活疫苗.
从山东某猪场送检的疑似猪支原体肺炎的病猪中用Friss培养基进行了猪肺炎支原体的分离,并对分离菌株进行了PCR鉴定和P46基因的克隆和序列分析,同时对培养物倍比稀释后进行了PCR扩增.结果成功分离到一株猪肺炎支原体,其P46基因核苷酸同源性与J株的同源性最高,为98.47%,将培养物稀到10-5倍后,取500μL提取DNA进行PCR扩增,结果为阳性,从而充分地证明了该分离产物就是猪肺炎支原体.
目的:建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型差减文库,克隆差异表达基因并分析筛选不同血清型间免疫保护相关基因.方法:采用cDNA代表性差异分析法(cDNARDA),通过三轮消减杂交后获得特异性差异表达基因,克隆入PGEM-T载体,建立差减基因文库,随机挑选120个克隆子进行测序,获得的不同的差异表达基因序列,应用DNAMAN软件进行差异基因序列分析.经DNA印迹证实后,采用Interne
本研究从鸭疫里氏杆菌提取基因组DNA,以细菌16S rRAN基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏杆菌的部分16S rRNA基因,克隆及测序结果表明其全长1512bp,G+C含量为51%,该序列已被Genebank收录,编号为DQ078779.同时利用生物软件对GeneBank收录的鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌的16S rRNA基因序列进行分析后,设计了鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌的种特异性引物,分
狂犬病毒属于弹状病毒科狂犬病毒属,病毒核酸为单股负链RNA.病毒基因组约12kb,结构为3leader-N-P-M-G-L-5,即核蛋白(N),磷蛋白(P),基质蛋白(M),糖蛋白(G),和病毒RNA依赖性聚合酶蛋白(L),同时在G-L基因之间存在假基因(Ψ),为无功能性基因,本文研究狂犬病毒基因及其功能。
从病死猪肺脏、肝脏中分离到4株革兰氏阴性杆菌.电镜观察发现菌体周身均有细长菌毛,光学显微镜下菌体呈卵圆形或球杆状,单个或双排列,两极浓染,有荚膜,无芽胞;在普通琼脂平板上长有半透明、浅白色、圆凸、表面湿润的光滑型菌落,拉动成丝线状;在麦康凯琼脂平板上形成降起、大而粘液样、易融合的粉红色菌落,在血琼脂平板上形成圆形凸起、灰白色、不溶血的菌落.生化试验鉴定为肺炎克雷伯菌肺炎亚种.根据Genebank上
2005年在北京地区采集正常猪泄殖腔拭子50份,河南省采集正常猪泄殖腔拭子123份,共计173份.共分离到大肠杆菌150株,分离率为86.7%.O抗原血清型检测结果表明猪源大肠杆菌血清型分布范围广,基本没有优势型.每个地区有36~47种,每个血清型一般有1株,部分2~3株,5株以上极少.多数菌株有1种血清型,少数有3~4种.共有22株没有检测到血清型.耐药性检测结果表明北京地区分离的菌株总体耐药率
以实验室工艺为基础,用发酵罐培养,对培养基、诱导剂及诱导条件、通气量、菌液灭活条件等进行了筛选优化.结果表明,重组菌株BL21(DE3)(pXK88acST3LT5)培养的最适培养基为改良LB培养基;乳糖为适合于工业化生产的诱导剂,确定了乳糖诱导的浓度为100 mmol·L-1,诱导时间不低于6 h;确定了2× 105 mL发酵罐培养的最佳通气量为500 L·min-1;确定了本工艺培养菌液的灭活
根据沙门氏菌编码侵袭蛋白E(invasion protean E,invE)的基因设计一对引物,对7株沙门氏菌和10株非沙门氏菌进行聚合酶链反应(PCR)扩增,结果沙门氏菌均出现463bp的特异性扩增条带,所有非沙门氏菌均未扩增出目的条带,提示这对引物的特异性较好.PCR结果显示,该方法能检测出3.0 × 102 cfu/mL纯培养的沙门氏菌,4种人工染菌食品的模拟检测结果显示,当各食品中初始含菌