【摘 要】
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以E.coli K12基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小约为1.3kb的赖氨酸-尸胺反向转运蛋白基因cadB.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,构建成重组质粒pXMJ19-cadB.然后将绿色荧光蛋白基因gfp基因融合到重组质粒pXMJ19-cadB的cadB基因的C-末端,得到重组表达载体pXBG,将其转化C.glutamicum ATCC13032并诱导CadB的表达.通
【机 构】
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天津科技大学工业发酵微生物教育部重点实验室,工业酶国家工程实验室,天津市工业微生物重点实验室,天津 300457
【出 处】
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2011年国际氨基酸产业创新与联盟发展高峰论坛
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以E.coli K12基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小约为1.3kb的赖氨酸-尸胺反向转运蛋白基因cadB.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,构建成重组质粒pXMJ19-cadB.然后将绿色荧光蛋白基因gfp基因融合到重组质粒pXMJ19-cadB的cadB基因的C-末端,得到重组表达载体pXBG,将其转化C.glutamicum ATCC13032并诱导CadB的表达.通过检测GFP蛋白来鉴定CadB蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达情况.结果表明,cadB基因能够在Cglutamicum ATCC13032表达,且其定位于谷氨酸棒杆菌的细胞膜上.CadB蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达及其在细胞膜中的定位,为研究它在谷氨酸棒杆菌中的功能奠定基础.
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