【摘 要】
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目的：在哺乳动物细胞中表达并纯化单纯疱疹病毒Ⅱ型表面糖蛋白C(glycoprotein C,gC)胞外抗原表位富集区片段,对其免疫活性进行分析.方法：优化筛选HSV-2 gC蛋白胞外抗原富集区基
【机 构】
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南京军区军事医学研究所,南京210002
【出 处】
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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议
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目的：在哺乳动物细胞中表达并纯化单纯疱疹病毒Ⅱ型表面糖蛋白C(glycoprotein C,gC)胞外抗原表位富集区片段,对其免疫活性进行分析.方法：优化筛选HSV-2 gC蛋白胞外抗原富集区基因序列并化学合成,以pMCE5为载体构建,构建真核表达质粒pMCE5-gC2并转染至CHO细胞进行真核表达,亲和层析纯化重组蛋白.以纯化的gC2重组蛋白为抗原,混合弗氏佐剂免疫小鼠,制备抗血清,间接ELISA法检测其效价.结果：成功构建真核表达重组质粒pMCE5-gC2,并纯化获得浓度为401tg/ml的gC2重组蛋白.通过三次免疫小鼠,获得抗体效价达到3×108的高滴度的抗血清.讨沦：在哺乳动物细胞中表达纯化获得的gC2重组蛋白具有良好的免疫原性,为HSV亚单位疫苗及检测试剂的研制打下了良好的基础.
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