【摘 要】
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黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是番茄病毒病的主要病原之一.研究CMV编码蛋白与寄主蛋白之间的相互作用机制,对于阐明病毒致病机制以及寄主对病毒的感病/抗病
【出 处】
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中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会
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黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是番茄病毒病的主要病原之一.研究CMV编码蛋白与寄主蛋白之间的相互作用机制,对于阐明病毒致病机制以及寄主对病毒的感病/抗病作用机制,寻找新的抗病基因和抗病策略均具有重要意义.为利用酵母双杂交系统筛选、鉴定与CMV编码蛋白互作的寄主因子,本研究以接种CMV2d、4d、8d和14d后的番茄叶片为材料,构建了番茄酵母双杂交cDNA文库.文库总库容量为2.346×106CFU,重组率为100％,其中0.5-1kb片段文库库容量为1.02×106CFU,平均插入序列长度为684bp；1-2 kb片段文库库容量为8.56×105 CFU,平均插入片段长度为1207bp；大于2kb片段文库库容量为4.7×105CFU,平均插入片段长度为2193bp.随机挑取30个克隆进行测序,获得有效序列29条,其中有26条序列包含完整的开放阅读框,属于不同的独立基因,说明获得的文库具有丰富的多样性和较高的完整性.本研究成功构建了高质量番茄酵母双杂交cDNA文库,可以应用于病毒-寄主相互作用蛋白的大规模筛选,为研究CMV与番茄相互作用机制奠定了物质基础.
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