【摘 要】
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目的:观察人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)核酸提取过程中,弃上清后标本保存液残留量对HPV基因分型检测结果的影响,为HPV基因分型检测操作标准化提供依据。方法:采用流式荧光技术检测生殖道泌尿道分泌物HPV基因分型,根据弃上清后标本保存液残留量和标本的阴阳性分为8组:阴性标本组:N5μl、N20μl、N40μl、N80μl和阳性标本组:P5μl、P20μ1、P40μl
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院检验科
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目的:观察人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)核酸提取过程中,弃上清后标本保存液残留量对HPV基因分型检测结果的影响,为HPV基因分型检测操作标准化提供依据。方法:采用流式荧光技术检测生殖道泌尿道分泌物HPV基因分型,根据弃上清后标本保存液残留量和标本的阴阳性分为8组:阴性标本组:N5μl、N20μl、N40μl、N80μl和阳性标本组:P5μl、P20μ1、P40μl、P80μl,检测指标为内参和靶基因的检出率和DNA电泳,根据检测指标分析标本保存液残留量对检验结果的影响。结果:在提取HPV核酸过程中,当弃上清后HPV标本保存液残留量在20μl以下,内参和靶基因的检出率100%,当标本保存液残留40μl时,内参和靶基因的检出率40%,而当HPV保存液残留80μl时,内参和靶基因的检出率0%。为分析标本保存液对检测结果的影响是在DNA提取还是在扩增环节,我们将上述扩增有效的DNA提取液一分为二,一组加纯水,一组加标本保存液,加纯水组,内参和靶基因检出率100%。而加标本保存液组的检出率0%。结论:在HPV核酸提取过程中,弃上清后标本保存液残留量对HPV基因分型检测结果影响大,标本保存液可抑制PCR的扩增而影响检测结果导致假阴性,20μl以下才能保证检测结果的准确性。
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