茯苓菌核蛋白质的制备与质谱分析

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茯苓(Poria cocos (Schw.)Wolf)是我国传统的中药材和历史悠久的食品,也是湖南怀化靖州重要的经济作物和加工农产品。茯苓菌核是茯苓菌丝生长发育至中后期聚结成团,逐渐形成的块状结构,贮藏着大量营养物质,也是茯苓的药用部位。目前,茯苓菌核的研究主要体现在栽培、化学成分及其药理学研究三个方面,而化学成分研究主要集中在多糖和三萜化合物,蛋白质研究很少,茯苓菌核全蛋白的系统性研究至今未见报道。本课题以新鲜茯苓菌核为实验材料,采用蛋白质组学的方法对菌核蛋白质进行了初步的研究。结果表明茯苓菌核中可溶性蛋白质的含量大约为0.35%,其分子量主要分布在35~110 k D的区域。通过质谱鉴定和数据库检索从茯苓菌核中鉴定得到出140余种蛋白质,其中酶类最多,例如甘油醛-3-磷酸脱氢酶、6-磷酸葡糖酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、烷基氢过氧化物还原酶、肌苷-5’-单磷酸脱氢酶、2,5-二酮-D-葡萄糖酸还原酶、丝氨酸羟甲基转移酶、琥珀酰-CoA转移酶、磷酸甘油酸激酶、腺苷酸激酶、磷酸烯醇丙酮酸-蛋白磷酸转移酶、丙酮酸激酶、核糖磷酸焦磷酸激酶、磷酸乙酰转移酶、外切葡聚糖酶、1,4-β-D-葡聚糖纤维二糖水解酶、丙氨酰-tRNA合成酶、ATP合成酶、氨甲酰磷酸合酶、RNA聚合酶等。另外还鉴定得到一些普通的蛋白质,如延伸因子、核糖体蛋白、伴侣蛋白、微管蛋白、角蛋白,细胞骨架蛋白、细胞分裂蛋白等。茯苓菌核中蛋白质种类丰富,是开展茯苓蛋白质研究的理想材料。
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