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为了研究单色光对肉鸡脾脏发育的影响,本研究选用刚出壳的雄性AA肉鸡分别饲养在白光、红光、绿光和蓝光下2周,第三天做松果体摘除手术和假手术.采用HE染色、RT-PCR及免疫组织化学技术,研究了单色光对肉鸡脾脏的组织学变化以及其褪黑激素受体mRNA和蛋白表达的影响.结果显示:(1)绿光组14日龄肉鸡的脾小结直径较红光组和蓝光组高23.8%(P=0.029)和29.9%(P=0.004),与白光组差异不显著(P=0.541).松果体摘除后,白光组、红光组和绿光分别组的脾小结直径下降了43.9%(P=0.000)、45.9%(P=0.034)、50.8%(P=0.01),各光色组间差异不显著(P>0.05).该结果说明单色绿光能通过褪黑激素促进肉鸡脾脏的发育.(2)在14日龄AA肉鸡脾脏中成功扩增出了褪黑激素受体Mel1a、Mel1b和Mel1c基因的核酸片段.通过对DNA条带灰度的分析发现,对照组中绿光组Mel1a的mRNA水平分别比蓝、红、白光组高16.9%(P=0.003)、26.1%(P=0.000)、41.3%(P=0.001),而蓝、白和红光之间无显著差异(P=0.099~0A56).与Mel1a类似,绿光组Mel1b的mRNA分别比蓝、红和白光组高20.8%(P=0.140)、35.9%(P=0.041)和38.1(P=0.0024),蓝、白和红光之间无显著差异(P=0.364~0.927).绿光组Mel1c的mRNA比其他光色高出25.3%~52.3%(P=0.001~0.013).松果体摘除后,褪黑激素的3个亚型受体mRNA水平较对照组均大幅度下降(P<0.05),各光色间差异不显著(P>0.05).(3)免疫组化结果显示,Mel1b、Mel1c在脾脏白髓、红髓和血管广泛表达.Mel1b的免疫阳性细胞IOD值测定结果显示,绿光组的IOD值最高,分别较红、蓝光组高37.4%(P=0.000)、20.7%(P=0.006),白光组和绿光组无明显差异(P=0.076).松果体摘除后,所有光色组的褪黑激素受体Mel1b的表达明显下降了100%~170%(P<0.05),各光色间差异不显著(P>0.05).Mellc的免疫阳性细胞IOD值测定结果显示,绿光组的IOD值最高,分别较白、红光组高24.7%(P=0.018)、50.1%(P=0.000),绿光组和蓝光组无显著差异(P=0.086).松果体摘除以后,所有光色组Mel1c的表达量明显下降了100%~176.9%(P<0.05),且各光色间差异不显著(P>0.05).对照组与假手术组无论是脾小结直径还是褪黑激素3个亚型受体mRNA水平和蛋白水平在各光色组间均差异不显著性(P>0.05).以上结果表明,单色绿光照射肉鸡能使褪黑激素通过其受体有效地参与调节脾脏发育及其免疫功能.