【摘 要】
：
为探究双峰驼CYP1A酶体外活性及其对外源性药物代谢的影响,首先采用差速离心法制备双峰驼肝微粒体,并优化其体外孵育体系,然后采用高效液相色谱紫外检测法测定双峰驼肝微粒孵育体系中CYP1A酶特异性底物非那西丁的代谢产物对乙酰氨基酚的动态含量,并借助Origin Pro8.6软件计算出CYP1A的酶动力学参数.结果表明,双峰驼肝微粒体具有良好的酶活性,其蛋白含量为1.652±0.341 mg/g.经优
【机 构】
：
内蒙古农业大学兽医学院,农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
论文部分内容阅读
为探究双峰驼CYP1A酶体外活性及其对外源性药物代谢的影响,首先采用差速离心法制备双峰驼肝微粒体,并优化其体外孵育体系,然后采用高效液相色谱紫外检测法测定双峰驼肝微粒孵育体系中CYP1A酶特异性底物非那西丁的代谢产物对乙酰氨基酚的动态含量,并借助Origin Pro8.6软件计算出CYP1A的酶动力学参数.结果表明,双峰驼肝微粒体具有良好的酶活性,其蛋白含量为1.652±0.341 mg/g.经优化后孵育体系的最适宜底物浓度为200 μg/mL,最佳肝微粒体浓度为4.95 mg/mL,最适宜孵育时间为30min.双峰驼CYP1A酶体外孵育体系最大反应速度Vmax为0.2246±0.0418nmol/min/mg,米氏常数Km为5.5779±0.6342μmol/L,内在代谢清除率CLint为0.0804±0.0231 mL·min/mg.因此,本文通过借助特异性探针药物动力学特征的研究,成功检测了双峰驼CYP1A酶体外代谢活性.
其他文献
[目的]本研究旨在探讨MATE家族外排基因介导化脓隐秘杆菌的耐药机制。[方法]根据化脓隐秘杆菌分离株全基因组序列基因功能注释结果,选取MATE家族外排基因,并确定该基因上下游基因片段。设计特异性引物,PCR扩增化脓隐秘杆菌分离株MATE家族外排基因上下游片段；以pEASY-T1载体为模板,扩增卡那霉素抗性基因。采用双酶切、连接的方法构建上游基因片段+卡那霉素抗性基因+下游基因片段的重组质粒。利用电
林可霉素是由链霉菌产生的一种林可胺类抗生素,作用于敏感菌核糖体的50S亚基,阻止肽链的延长,从而抑制细菌细胞蛋白质的合成,对大多数革兰氏阳性菌和某些厌氧菌有抗菌作用.本研究在药敏试验、耐药基因筛选的基础上,在一株猪源肠球菌上鉴定了一种林可霉素耐药基因新亚型,暂命名为Lnu(G).Lnu(G)与已报道的Lnu(A)～Lnu(F)基因的氨基酸序列同源性存在着不同程度的同源性(31％～76％).耐药基因
[目的]检测福氏志贺菌中质粒介导的耐药性相关基因的流行情况,了解不同耐药基因在福氏志贺菌耐药性中发挥的作用。[方法]首先,运用微量肉汤稀释法测定实验室中保存的38株福氏志贺菌对临床常用的环丙沙星、头孢曲松、头孢哌酮等15种不同耐药机理的抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。然后,使用PCR法扩增喹诺酮类耐药基因：qnr、 qnrA、qnrB、qnrD、qnrS；β-内酰胺类耐药基因：ctx-M、ctx
[目的]：研究2008-2012年间从广东省宠物医院分离的肠杆菌中氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因的流行分布情况及其分子传播机制.[方法]使用MALDI TOF质谱鉴定2008-2012年收集的381株肠杆菌,按照美国临床实验室标准委员会(CLSI)推荐的琼脂稀释法测定所有菌株对常用的14种抗菌药的敏感性,对显示阿米卡星耐药的菌株采用PCR方法检测16S rRNA甲基化酶Rmt
(目的)编码23S rRNA甲基化酶的多重耐药基因cfr是目前发现的第一种可同时介导对五种化学结构不同的抗菌药物耐药的甲基转移酶,多次报道发现在动物和人医临床分离的葡萄球菌中.本研究针对广东省不同地区猪场中葡萄球菌的耐药情况和cfr流行情况开展了流行性调查.(方法)对广东省不同地区猪场的猪及其密切接触人员的肛门拭子和鼻拭子进行葡萄球菌分离鉴定,采用PCR以及基因测序来鉴定葡萄球菌,并用PCR方法分
为了解圈养大熊猫肠道大肠杆菌耐药性、产ESBLs酶及其基因型特性.对96株分离自成都大熊猫繁育研究基地的大熊猫粪源大肠杆菌进行药物敏感性检测、产ESBLs双纸片确认试验及ESBLs基因型(blaTEM、blaSHV、blaCTX-M和blaOXA)PCR检测.结果显示,96株菌对18种抗菌药物呈不同水平的耐药性(耐药率范围1.06％～69.79％),其中对氨苄西林、头孢唑啉、四环素和复方新诺明耐药
利用超高效液相色谱-串联质谱法测定了诺氟沙星(NFX)对日本鳗鲡混饲口灌后血液和组织中的含量变化并进行药动学分析.结果表明NFX以30 mg·kg-1的剂量单次混饲口灌日本鳗鲡后,吸收分布迅速,达峰时间(Tmax)、吸收(T1/2Ka)和分布半衰期(T1/2α)分别为3.000 h、1.012 h和1.570 h.消除也较快,消除半衰期(T1/2β)为15.267 h,总清除率(CL)为1.315
[目的]通过测定复方双氯芬酸钠注射液在猪肌内注射给药的血药浓度-时间数据,获得相关药动学参数,了解其中活性组分在猪体内的药动学特征,以指导临床合理用药.[方法]采用交叉试验设计.8头体重较一致的健康断奶仔猪随机分为两组,分别单剂量静脉注射和肌内注射复方双氯芬酸钠注射液,静注和肌内注射剂量均为1 mg/kg bw(以双氯芬酸钠计),两阶段给药洗脱期为2周.给药后按预定时间采集血样.血浆中双氯芬酸和对
本研究采用大鼠、鸡、猪、羊和牛的肝微粒孵育技术开展了泰妙菌素的体外代谢研究。通过UPLC-Q/TOF和MetabolynxTM软件来识别和鉴定泰妙菌素的代谢产物，在大鼠、鸡、猪、牛和羊肝微粒中分别有23、17、18、21和21种代谢物检出。通过对其MS/MS的分析，初步鉴定了它们的化学结构。为验证体外获得的实验结果，进一步的开展了泰妙菌素在大鼠、鸡和猪体内代谢研究，分别有19、8和9种代谢物检出。
[目的]研究氟苯尼考在罗非鱼体内的药物代谢动力学特征.[方法]在30℃水温条件下,选用400尾罗非鱼,随机分成2组,以单剂量15 mg/kg分别进行肌注、口灌给药.给药前采一批空白样,然后于给药后的5、10、15、30、45 min及1、2、4、8、12、16、24、36、48、72、96、120、144、168 h,用2 mL静脉注射器于尾静脉处采血2～3mL,每个时间点采集10尾鱼血样,分离血