【摘 要】
:
[目的]:研究2008-2012年间从广东省宠物医院分离的肠杆菌中氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因的流行分布情况及其分子传播机制.[方法]使用MALDI TOF质谱鉴定2008-2012年收集的381株肠杆菌,按照美国临床实验室标准委员会(CLSI)推荐的琼脂稀释法测定所有菌株对常用的14种抗菌药的敏感性,对显示阿米卡星耐药的菌株采用PCR方法检测16S rRNA甲基化酶Rmt
【机 构】
:
华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室,广州510642
【出 处】
:
中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
论文部分内容阅读
[目的]:研究2008-2012年间从广东省宠物医院分离的肠杆菌中氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因的流行分布情况及其分子传播机制.[方法]使用MALDI TOF质谱鉴定2008-2012年收集的381株肠杆菌,按照美国临床实验室标准委员会(CLSI)推荐的琼脂稀释法测定所有菌株对常用的14种抗菌药的敏感性,对显示阿米卡星耐药的菌株采用PCR方法检测16S rRNA甲基化酶RmtA、RmtB、RmtC、RmtD、RmtE、RmtF、RmtG、RmtH、ArmA及npmA基因,采用脉冲场凝胶电泳方法(PFGE)分析携带16SrRNA甲基化酶基因的阳性菌株垂直传播情况,通过接合转移、S1-pFGE以及southern杂交等实验分析携带16S rRNA甲基化酶基因阳性菌株的水平传播情况.[结果]381株宠物源肠杆菌中包括大肠杆菌343株,肺炎克雷伯菌30株,奇异变形杆菌6株,阴沟肠杆菌2株.98株(25.7%)对阿米卡星耐药的菌株中,大肠杆菌83株,肺炎克雷伯菌12株,奇异变形杆菌2株,阴沟肠杆菌1株.仅检测到rmtB和armA两种基因,72株rmtB阳性,检测率为18.9%,6株armA阳性,检测率为1.5%,另外有2株同时携带rmtB、armA两种基因.PFGE分型表明阳性菌株之间亲缘关系较远,无克隆传播现象.S1-PFGE及southern杂交实验表明rmtB基因位于多种大小质粒上.[结论]16S rRNA甲基化酶基因广泛存在于我国宠物源肠杆菌中,含有16S rRNA甲基化酶基因的可接合质粒可能在人与宠物之间水平传播,我们应该加强对宠物源细菌耐药性的监测.
其他文献
黄曲霉毒素是一种各种食物广泛存在的毒素,具有很强的致癌性.因此,黄曲霉毒素被认为是引起公共卫生问题的罪魁祸首,而黄曲霉毒素B1 (AFB1)是黄曲霉家族中毒性最强的一员.然而,人们对黄曲霉毒素B1和动物机体先天免疫一自噬之间的关系报道很少.在本研究中,我们发现黄曲霉毒素B1能过诱导巨噬细胞(包括RAW264.7和THP-1)和Hela细胞发生完全自噬,而且依赖MEK/ERK途径,并与Beclin-
[目的]通过沙咪珠利的小鼠精子畸形和骨髓微核,检测受试品的遗传毒性,为沙咪珠利的进一步开发利用奠定基础.[方法]①小鼠精子畸形试验:60只清洁级昆明小鼠随机分为五组,每组12只.依据沙咪珠利LD50(LD50为5776 mg/kg)及其理化性质,试验时设2500 mg/kg体重(高)、1250mg/kg体重(中)、625 mg/kg体重(低)三个剂量组,阳性对照选用环磷酰胺(40 mg/kg b.
[目的]氟苯尼考作为20世纪90年代以来用于治疗牛、猪、禽及鱼类的细菌性疾病起到了至关重要的作用,但是并没有批准在宠物临床上使用.本研究目的在于筛查中国农业大学动物医院就诊宠物的氟苯尼考耐药菌的分离率,以及其耐药的基因表型.[方法]采集来中国农业大学动物医院就诊的宠物鼻腔拭子、肛门拭子以及创口拭子,在含8ug/ml氟苯尼考的BHI培养基上筛选耐药菌株.氟苯尼考耐药菌用微量肉汤稀释法测其对氟苯尼考的
为研究仔猪肌注补铁剂中添加多维对哺乳仔猪增重的影响,在同一栋产仔舍选择体况、膘情、胎次和预产期相近的母猪15头,将每头母猪所产仔猪按头数及初生重平均分成对照组和试验组.对照组仔猪在出生后第2天颈部肌肉注射1.5mL国产某仔猪补铁剂;试验组仔猪在出生后第2天颈部肌肉注射1.5mL添加多维仔猪补铁剂.试验结果显示,在1-21日龄试验组与对照组相比增重差异显著(P<0.05).在1-7日龄、 7-14日
随着纳米技术的迅速发展和纳米银越来越广泛的应用,纳米银的制备方法也有了很大的发展.目前,纳米银的制备方法大致可分为物理法、化学法和生物法.随着纳米银在生物医学领域的应用,其生物相容性越来越受到人们的关注,因此绿色合成法越来越受到人们的重视.评价绿色合成法必须满足以下三个方面:选择可溶解的介质;选择环境友好型的还原剂;选择无毒物质作为纳米银的稳定剂.香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒和免疫增强等作用,在医学
[目的]获得携带lsa(E)基因肠球菌新型接合转移质粒pY13的全核酸序列,并分析lsa(E)基因在其他肠球菌中的遗传背景和传播方式。[方法]2013年从猪场分离到7猪lsa(E)阳性肠球菌菌(粪肠球菌n=5,屎肠球菌n=1,鸡肠球菌n=1),通过S1-PFGE、Southern杂交、电击转化和重叠PCR等方法对lsa(E)基因的定位和基因环境进行分析;同时采用454 GS-FLX测序仪对pY13
为了了解长期使用氟苯尼考的猪场土壤中氟苯尼考耐药基因的分布情况,我们通过宏基因组学的方法直接提取土壤总DNA,使用Covaris System超声波打断仪将DNA打碎成大小约~3k的片段,以小片段质粒为载体,将DNA片段与载体质粒连接并电转化至宿主菌——E.coli DH5α中,构建了土壤宏基因组文库.我们对该文库进行氟苯尼考抗性功能筛选,得到2株阳性克隆子,通过对插入片段测序并分析发现,其中一个
[目的]本研究旨在探讨MATE家族外排基因介导化脓隐秘杆菌的耐药机制。[方法]根据化脓隐秘杆菌分离株全基因组序列基因功能注释结果,选取MATE家族外排基因,并确定该基因上下游基因片段。设计特异性引物,PCR扩增化脓隐秘杆菌分离株MATE家族外排基因上下游片段;以pEASY-T1载体为模板,扩增卡那霉素抗性基因。采用双酶切、连接的方法构建上游基因片段+卡那霉素抗性基因+下游基因片段的重组质粒。利用电
林可霉素是由链霉菌产生的一种林可胺类抗生素,作用于敏感菌核糖体的50S亚基,阻止肽链的延长,从而抑制细菌细胞蛋白质的合成,对大多数革兰氏阳性菌和某些厌氧菌有抗菌作用.本研究在药敏试验、耐药基因筛选的基础上,在一株猪源肠球菌上鉴定了一种林可霉素耐药基因新亚型,暂命名为Lnu(G).Lnu(G)与已报道的Lnu(A)~Lnu(F)基因的氨基酸序列同源性存在着不同程度的同源性(31%~76%).耐药基因
[目的]检测福氏志贺菌中质粒介导的耐药性相关基因的流行情况,了解不同耐药基因在福氏志贺菌耐药性中发挥的作用。[方法]首先,运用微量肉汤稀释法测定实验室中保存的38株福氏志贺菌对临床常用的环丙沙星、头孢曲松、头孢哌酮等15种不同耐药机理的抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。然后,使用PCR法扩增喹诺酮类耐药基因:qnr、 qnrA、qnrB、qnrD、qnrS;β-内酰胺类耐药基因:ctx-M、ctx