【摘 要】
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目的 探讨Polη缺陷对氢醌(HQ)所致肝细胞DNA损伤的影响.方法 将L02-POLH-nsc细胞(Polη表达正常的L-02肝细胞)和L02-POLH-sh细胞(Polη表达缺陷的L-02肝细胞)用HQ 0,10,20和40 μmol· L-1处理24 h后,采用彗星实验检测DNA损伤状况,并采用图像分析软件CASP-1.2.2对之进行分析,每个剂量组共分析100个细胞,以彗星的尾部DNA含量
【机 构】
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赣南医学院预防医学系,江西赣州341000 深圳市疾病预防控制中心,广东深圳518055
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目的 探讨Polη缺陷对氢醌(HQ)所致肝细胞DNA损伤的影响.方法 将L02-POLH-nsc细胞(Polη表达正常的L-02肝细胞)和L02-POLH-sh细胞(Polη表达缺陷的L-02肝细胞)用HQ 0,10,20和40 μmol· L-1处理24 h后,采用彗星实验检测DNA损伤状况,并采用图像分析软件CASP-1.2.2对之进行分析,每个剂量组共分析100个细胞,以彗星的尾部DNA含量(TD)、尾长(TL)、尾距(TM)和Olive尾矩(OTM)为评价指标；采用细胞免疫荧光实验联合激光共聚焦显微术检测γ-H2AX焦点形成状况.结果 彗星实验结果显示,HQ作用于L02-POLH-nsc和L02-POLH-sh细胞24 h后均能以剂量依赖性的方式诱导DNA损伤水平的增加.在相同的HQ作用剂量(10,20或40 μmol·L-1组)条件下,L02-POLH-sh细胞的TD,TL,TM和OTM值均明显地大于L02-POLH-nsc细胞,差别具有统计学意义(P＜0.01).细胞免疫荧光联合激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示,HQ作用24 h后,L02-POLH-nsc和L02-POLH-sh细胞内的γ-H2AX焦点数均有随着HQ作用剂量的增加而增加的趋势,并呈现一定的剂量依赖性,10,20和40 μmol·L-1组的γ-H2AX焦点数均明显地多于对照组(P＜0.05)；并且,在相同的HQ作用剂量(10,20或40μmol·L-1组)条件下,L02-POLH-sh细胞内的γ-H2AX焦点数明显多于L02-POLH-nsc细胞(P＜0.05).结论 Polη缺陷会明显增强HQ诱导的遗传毒性,并且肝细胞可能拥有Polη依赖性的机制来处理HQ所诱发生成的DNA双链断裂损伤.
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