益气活血法与补肾生髓法对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路基因及差异蛋白表达的影响

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目的探讨益气活血法和补肾生髓法对局灶性脑缺血大鼠Notch信号转导通路基因及差异蛋白表达的影响。方法SD雄性大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、益气活血法组和补肾生髓法组,每组15只。改良线栓法建立MCAO/R大鼠模型。连续给药7天后,采用PCR基因芯片测定额顶叶皮质Notch信号转导通路基因表达,免疫组化Envision二步法检测额顶叶皮质区β-catenin、Krt1蛋白的表达,Western-Blot检测Nr4a2的表达。结果基因芯片共检测Notch信号通路91个基因。与假手术组比较,模型组14种基因表达有显著差异,其中Notch4基因表达显著下调(P<0.05),其它13种基因表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较,益气活血法组17种基因表达有显著差异,其中3种基因表达显著下调(P<0.05),其它14种基因表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较,补肾生髓组20种基因表达有显著差异,其中8种基因表达显著下调(P<0.05),其它12种基因表达显著上调(P<0.05)。与补肾生髓组比较,益气活血组7种基因表达有显著差异,其中5种基因表达显著上调(P<0.05),2种基因表达显著下调(P<0.05)。与假手术组比较,模型组β-catenin和Krt1蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,益气活血组β-catenin和Krtl蛋白表达显著降低(P<0.05),补肾生髓组β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05);益气活血组β-catenin蛋白表达显著低于补肾生髓组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组Nr4a2蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,益气活血组和补肾生髓组Nr4a2蛋白表达显著减少(P<0.01);与补肾生髓组比较,益气活血组Nr4a2蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论益气活血法和补肾生髓法能影响脑缺血再灌注后Notch信号调控通路部分基因表达,能通过降低皮质β-catenin、Krt1和Nr4a2蛋白的表达,对Notch信号通路产生调控作用,进而对脑缺血后内源性NSCs增殖分化产生影响。
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