【摘 要】
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目的：探讨多聚(腺苷二磷酸-核糖)聚合酶1(PARP-1)介导的多聚腺苷二磷酸-核糖基化作用(PARylation)快速调控氢醌(HQ)诱导的细胞周期调节的分子机制.方法：以PBS为对照,HQ (0-20 μM)为处理,处理TK6细胞48 h或72 h后,多柔比星(DOX),蛋白酶体抑制剂(MG-132)和3-氨基苯甲酰胺(3-ABA)分别处理HQ预处理细胞4h和24 h.PI标记法分析细胞周期.
【机 构】
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广东医科大学公共卫生学院东莞市环境医学重点实验室,广东东莞,523808;南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广东广州,510515
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目的：探讨多聚(腺苷二磷酸-核糖)聚合酶1(PARP-1)介导的多聚腺苷二磷酸-核糖基化作用(PARylation)快速调控氢醌(HQ)诱导的细胞周期调节的分子机制.方法：以PBS为对照,HQ (0-20 μM)为处理,处理TK6细胞48 h或72 h后,多柔比星(DOX),蛋白酶体抑制剂(MG-132)和3-氨基苯甲酰胺(3-ABA)分别处理HQ预处理细胞4h和24 h.PI标记法分析细胞周期.定量RT-PCR检测细胞mRNA表达水平(PARP-1,RAS,TEN,p53和Rb).Western blotting检测相关蛋白表达水平(PAR,PARP-1,H-RAS).RNA干扰技术构建PARP-1稳定沉默细胞株.蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)和激光共聚焦荧光显微镜检测蛋白至相互作用和蛋白质修饰.
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