PCR结合斑点杂交技术在检测自然发病鸡群中鸡传染性贫血病毒中的应用

来源 :第十六次全国家禽学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xhb876
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本试验利用非放射性标记物地高辛(DIG)通过PCR法制备DNA探针,运用PCR技术、斑点杂交方法和PCR产物结合斑点杂交方法检测病料组织中的CAV核酸,比较三个方法的检测效果和相关性.PCR法标记的核酸探针,只与自身病毒核酸反应与其它病毒核酸均不显色,特异性强。该探针可检测到lpg量的CAV核酸片段,灵敏度高。用PCR一电泳、斑点杂交和PCR产物斑点杂交检测各样品表明,PCR扩增产物斑点杂交法检出率(77.27%,17/22)高于组织DNA直接斑点杂交法(50% ,11/22),更显著高于单纯PCR扩增法(11%,2/22) o经PCR一电泳检测为阴性的某些样品,样品DNA直接经斑点杂交检测却有阳性反应;相应样品的PCR产物经斑点杂交检测却有较强的信号;某些经PCR一电泳检测目的条带模糊的样品,相应PCR产物经斑点杂交检测却有很强的信号。
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