【摘 要】
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GRIM-19 (Gene associated with retinoid-interferon induced mortality 19),即干扰素/视黄酸联合诱导的死亡相关基因19,是新近发现的一种细胞内死亡调控蛋白,在细胞生长控制和先天性免疫反应中发挥着至关重要的作用.但有关鱼类GRIM-19基因的相关研究还未见到报道.本研究从石斑鱼脾脏cDNA文库中克隆得到了石斑鱼GRIM-19基因,成
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GRIM-19 (Gene associated with retinoid-interferon induced mortality 19),即干扰素/视黄酸联合诱导的死亡相关基因19,是新近发现的一种细胞内死亡调控蛋白,在细胞生长控制和先天性免疫反应中发挥着至关重要的作用.但有关鱼类GRIM-19基因的相关研究还未见到报道.本研究从石斑鱼脾脏cDNA文库中克隆得到了石斑鱼GRIM-19基因,成功构建了重组表达载体,进行了原核表达,并在鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprini, EPC)中进行了亚细胞定位.序列分析表明,石斑鱼GRIM-19基因全长为580bp,ORF为435bp,编码一个长为144aa,分子量为16.9× 103的推定蛋白.重组原核表达质粒pET32a/GRIM-19转化大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导表达,获得一条约37.0×103的融合蛋白.重组真核表达质粒pEGFP-N3/GRIM-19转染EPC细胞,经DAPI和MitoTracker Red双染色后,在荧光显微镜下观察显示GRIM-19与MitoTracker Red共定位,揭示石斑鱼GRIM-19定位于线粒体上；而且通过缺失突变显示位于GRIM-19蛋白30-40的氨基酸序列对定位于线粒体上是必须的.
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中华鲟是一种介于软骨鱼类与硬骨鱼类间的古老物种,其生存岌岌可危,全面了解中华鲟幼鱼的种群适合度是保护中华鲟的关键.临界游泳能力是与中华鲟种群适合度密切相关的重要表型特征,在实验室内的半开放大型游泳水槽中(190 cm × 50 cm× 85 cm,水位：50 cm),测定1+龄中华鲟幼鱼的临界游泳速度(Ucrit)和相对游泳速度(Ucrit).结果表明：个体大小对中华鲟幼鱼的游泳能力并没有显著影响
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