【摘 要】
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目的：实现蛤蚧与其混伪品的高效鉴定,并建立一种快速、准确的鉴别蛤蚧制品中蛤蚧样品的特异微条码鉴定方法 .方法：本研究共收集蛤蚧及其混伪品16 个物种269 份,蛤蚧制品5 种15 个批次.提取动物样品DNA,通过PCR 扩增测序得CO1 序列,经MEGA 5.0 比对分析后,对蛤蚧及其混伪品进行DNA 条形码鉴定分析；并设计特异引物,扩增蛤蚧CO1 序列短片段,对本研究的相关制品进行鉴别.结果：蛤
【机 构】
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淮北师范大学生命科学学院,淮北 235000;中国中医科学院中药研究所,北京 100700 中国中
【出 处】
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2017年中国药学大会暨第十七届中国药师周
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目的：实现蛤蚧与其混伪品的高效鉴定,并建立一种快速、准确的鉴别蛤蚧制品中蛤蚧样品的特异微条码鉴定方法 .方法：本研究共收集蛤蚧及其混伪品16 个物种269 份,蛤蚧制品5 种15 个批次.提取动物样品DNA,通过PCR 扩增测序得CO1 序列,经MEGA 5.0 比对分析后,对蛤蚧及其混伪品进行DNA 条形码鉴定分析；并设计特异引物,扩增蛤蚧CO1 序列短片段,对本研究的相关制品进行鉴别.结果：蛤蚧CO1 序列长度为658 bp,种内最大遗传距离为0.015,远小于种间最小遗传距离0.273,且NJ 树图中蛤蚧单独聚为一支,自展支持率高达99％,表明蛤蚧可与混伪品准确区分.特异引物CO1SF2/CO1SR2 和CO1SF3/CO1SR3 分别扩增出200 bp 和133 bp 的短片段,可实现蛤蚧及其混伪品的鉴别；应用引物CO1SF3/CO1SR3 扩增蛤蚧制品的总DNA 均可得到133 bp 的目的 片段,经测序验证为蛤蚧样品.结论：基于CO1 序列的DNA 条形码与特异微条码技术可实现蛤蚧及其混伪品的高效鉴别,并可应用于蛤蚧相关制品的特异鉴定,保障临床用药安全.
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