【摘 要】
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目的：利用重组聚合酶扩增(RPA)建立一种快速鉴定草药营养产品中植物物种的方法 。方法：利用银杏和槐在ITS2 及rbcL 区域内的特异性短序列来建立RPA 试验,并根据物种特异性序列来设计用于RPA 试验的引物和探针。首先,在网上购买了36 份银杏草药产品,并进行DNA 提取。通过聚合酶链式反应(PCR)和焦磷酸测序确认从银杏草药产品中提取的DNA 中存在银杏以及槐的物种特异性序列。最后,利用R
【机 构】
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中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所,北京 100193
【出 处】
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2017年中国药学大会暨第十七届中国药师周
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目的：利用重组聚合酶扩增(RPA)建立一种快速鉴定草药营养产品中植物物种的方法 。方法：利用银杏和槐在ITS2 及rbcL 区域内的特异性短序列来建立RPA 试验,并根据物种特异性序列来设计用于RPA 试验的引物和探针。首先,在网上购买了36 份银杏草药产品,并进行DNA 提取。通过聚合酶链式反应(PCR)和焦磷酸测序确认从银杏草药产品中提取的DNA 中存在银杏以及槐的物种特异性序列。最后,利用RPA 结合试纸条(LFS)的方法 验证鉴定结果 。结果：36 份银杏草药产品样品中,34 份样品检测出银杏的序列,9 份样品检测出槐的序列。鉴定过程中,重组聚合酶扩增-试纸条联合(RPA-LFS)的方法 表现出比PCR 更高的特异性、灵敏度和效率,且本试验从含有相同化学物质的不同物种中成功鉴定出了目标物种。利用此种方法 ,整个鉴定过程仅需DNA 1ng,仅需用时30 分钟。结论：草药营养产品的掺假率很高。重组聚合酶扩增-试纸条联合(RPA-LFS)可以开发为草药营养产品中植物物种现场快速鉴定的新型工具。
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