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【目的】大量研究表明,长期摄入过量氟化物对人体是有害的,几种模型中均证实氟化物的毒性。此外,有研究发现砷诱导酵母细胞发生凋亡与细胞内ROS和Ca2+的增加有关。然而,目前尚未研究表明氟化钠(NaF)诱导的酵母细胞死亡是否与细胞内ROS、NO和Ca2+的积累有关。本研究旨在探讨ROS、NO和Ca2+在氟化钠诱导酵母细胞死亡中的作用机制。【方法】用含有NaF浓度分别为0,15,30,60,90,120,150mM的YPD培养基培养酵母细胞,每隔2h测定一次酵母细胞培养液的OD值,并绘制生长曲线;用亚甲基蓝染色法进行细胞存活率测定;通过平板点样法探究酵母细胞对NaF的耐受性;利用流式细胞仪测定胞内ROS、NO和Ca2+含量;针对90mMNaF处理组,用ROS抑制剂抗坏血酸(AsA)、NO消除剂(Hemoglobin)和Ca2+抑制剂乙二醇双四乙酸(EGTA)与NaF共同处理酵母细胞12 h和24h后,用平板点样法和涂布法测定抑制剂对NaF诱导酵母细胞死亡的影响。【结果】1)氟化钠可抑制酵母细胞的生长和分裂,并具有一定的浓度依赖性。2)随着氟化钠浓度的增加,酵母细胞的相对存活率和对NaF的耐受性越来越低。3)ROS的水平在酵母细胞暴露于30、90和150mM的氟化钠组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);AsA和NaF共同处理可发现酵母细胞存活率高于NaF组,但差异无统计学意义。4)NO的含量在酵母细胞暴露于30、90和150mM的氟化钠组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);Hemoglobin和NaF共同处理可发现酵母细胞存活率高于NaF组,差异具有统计学意义(P<0.01)。5)Ca2+的水平在酵母细胞暴露于90和150mM的氟化钠组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);EGTA和NaF共同处理可发现酵母细胞存活率高于NaF组,差异具有统计学意义(P<0.01)。6)ROS、NO和Ca2+水平分别在酵母细胞暴露于30、90和150mM的氟化钠组最高。【结论】结果表明氟化钠是通过诱导ROS、NO和Ca2+水平升高引起酵母细胞死亡,且氟化钠诱导ROS、NO和Ca2+水平升高存在一定的上下游关系,其关系为NaF→ROS→NO→Ca2+。