【摘 要】
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猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引起世界各地猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,PEDV的S蛋白是由S基因编码的膜蛋白,S蛋白与细胞表面受体结合,诱导细胞膜融合,在感染宿主体内S蛋白介导抗体产生过程中发挥重要生物学作用.S蛋白表面含有重要的抗原决定簇,有良好的免疫原性.通过对PEDV流行毒株S基因进行序列分析,选取S1蛋白502-641
【机 构】
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安徽农业大学生命科学学院,合肥230000;上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106
【出 处】
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上海市畜牧兽医学会2015年学术年会
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猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引起世界各地猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,PEDV的S蛋白是由S基因编码的膜蛋白,S蛋白与细胞表面受体结合,诱导细胞膜融合,在感染宿主体内S蛋白介导抗体产生过程中发挥重要生物学作用.S蛋白表面含有重要的抗原决定簇,有良好的免疫原性.通过对PEDV流行毒株S基因进行序列分析,选取S1蛋白502-641氨基酸位置,利用大肠杆菌密码子偏嗜性进行密码子优化,PCR融合扩增片段,并将其克隆到原核表达载体上,获得重组质粒PET32a-S417、PXXGST-S417.将获得的重组质粒转化到BL21感受态细胞,成功诱导表达、纯化,以GST-S417重组蛋白作为抗原免疫兔子制备多克隆抗体.实验结果表明本实验所选区域具有好的抗原免疫原性,制备的多克隆抗体能特异性识别目的蛋白,为PEDV诊断试剂盒和疫苗提供了理论依据.
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