【摘 要】
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建立了多反应监测结合肽段串联体蛋白(concatamers of Q peptides,QconCATs)和18O 同位素标记对脂肪合成代谢通路的蛋白质进行相对定量的新方法.首先,挑选待检测蛋白的特异性肽段构建QconCAT 质粒,并将其转化导入大肠杆菌体系后进行表达.之后,对QconCAT 蛋白的酶切条件做了优化并考察了18O标记效率.其次,建立脂肪合成代谢通路蛋白多反应监测的蛋白质相对新定量方
【机 构】
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北京理工大学生命学院,北京100081
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建立了多反应监测结合肽段串联体蛋白(concatamers of Q peptides,QconCATs)和18O 同位素标记对脂肪合成代谢通路的蛋白质进行相对定量的新方法.首先,挑选待检测蛋白的特异性肽段构建QconCAT 质粒,并将其转化导入大肠杆菌体系后进行表达.之后,对QconCAT 蛋白的酶切条件做了优化并考察了18O标记效率.其次,建立脂肪合成代谢通路蛋白多反应监测的蛋白质相对新定量方法.最后,对肥胖大鼠与正常大鼠脂肪代谢通路的蛋白质进行定量分析,发现脂肪合成通路的丙二酸单酰辅酶A-ACP 转移酶,烯酰-ACP 还原酶表达量均有显著上升(P<0.05).该结论与之前报道肥胖相关的文献结果吻合,证明了本方法在定量生物样品的应用中的可靠性.
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