猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF-6基因片段的真核表达

来源 :2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:charlehc1986
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目前用于预防PRRS主要是灭活苗和弱毒苗,灭活苗的效果不稳定,经常导致免疫失败;弱毒苗存在毒力返强的危险,而且有可能传播疫苗毒.相关研究数据显示,PRRSV ORF6(M蛋白)也与病毒中和作用有关,而且M蛋白在细胞免疫中居主要地位,为进一步研究M蛋白的功能以及重组杆状病毒Bacmid—ORF6的免疫效果奠定基础.猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在我国自1996年发现以来,已在全国范围内爆发流行。如何建立一种快速、准确、经济、安全、实用、标准规范性的PRRS检测方法,是整个兽医界所面临的一个课题。本实验研究对TA-12分离株的ORF6全基因序列进行了扩增、克隆,用杆状病毒做载体,构建了ORF6基因的真核表达载体,此载体可高效表达外源基因。这个表达体系的主要特点是可以获得大量抗原性、免疫原性较好的,与天然蛋白功能相似的可溶性重组蛋白。重组杆状病毒感染昆虫细胞后,可以对外源蛋白进行许多真核细胞的转录后加工作用,包括糖基化、磷酸化、酰基化、正确的信号肽切割、蛋白水解以及适当的折叠作用,而且还可将重组蛋白聚集定位于天然蛋白的同一细胞器上,还能进行适当的寡聚化装配,因此是表达有生物活性的蛋白质的理想载体。本研究对于PRRS的流行病学调查、病原学研究及诊断防治均具有重要意义。
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