【摘 要】
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目的:观察腺病毒载体介导的抑癌基因LRIG1对前列腺癌细胞(PC-3细胞)增殖力、凋亡等生物学特性的影响,探讨LRIG1在前列腺癌发生发展中的机制.方法:从前列腺增生组织获取目的基因LRIG1并将其与腺病毒骨架质粒pAd/PL-DEST包装,获取正确的重组腺病毒质粒pAD-LRIG1并扩增后,提取得到高滴度pAD-LRIG1(1×108PFU/ml).将pAD-LRIG1按MOI=10加入PC-3
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院泌尿外科 上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科
【出 处】
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第十次全国中西医结合男科学术大会暨第六届广西中医、中西医结合男科学术大会
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目的:观察腺病毒载体介导的抑癌基因LRIG1对前列腺癌细胞(PC-3细胞)增殖力、凋亡等生物学特性的影响,探讨LRIG1在前列腺癌发生发展中的机制.方法:从前列腺增生组织获取目的基因LRIG1并将其与腺病毒骨架质粒pAd/PL-DEST包装,获取正确的重组腺病毒质粒pAD-LRIG1并扩增后,提取得到高滴度pAD-LRIG1(1×108PFU/ml).将pAD-LRIG1按MOI=10加入PC-3细胞中,并设置空白对照,培养48小时后,收集细胞并采用RT-PCR和Western-blot检测PC-3细胞中LRIG1的表达;将pAD-LRIG1按MOI=0、5、20(对照、低组、高组)分别加入PC-3细胞中,培养48小时后,采用BrdU法检测细胞的增殖率,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:通过RT-PCR和Western-Blot检测,在PC-3细胞中加入pAD-LRIG1,能使LRIG1在核酸和蛋白水平表达;通过BrdU检测,对照、低组、高组的细胞增殖率分别为58.6±5.2%、41.3±4.7%、31.6±3.8%,差异有统计学意义(P<0.05);通过流式细胞仪检测,对照、低组、高组的细胞凋亡率分别为3.8±0.6%、12.6±1.5%、18.2±3.1%,差异有统计学意义(P<0.05).结论:腺病毒载体介导的抑癌基因LRIG1能增强PC-3细胞中LRIG1的表达, LRIG1基因表达上调后能有效抑制PC-3细胞的增殖率和增加细胞的凋亡率,为前列腺癌发生发展的进一步研究提供了理论依据.
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