【摘 要】
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目的:观察不同剂量蟾毒灵(Bufalin)对人前列腺癌细胞株Du145体外生长细胞增殖的作用及其可能机制.方法:人前列腺癌DU145细胞用含10%胎牛血清、1%双抗(青霉素和链霉素)的RPMI 1640培养液建立稳定细胞系.实验分组:空白对照组、蟾毒灵剂量组(0.0001 μ mol/L),蟾毒灵剂量组(0.001 μ mol/L),蟾毒灵剂量组(0.01 μ mol/L),蟾毒灵剂量组(0.1
【机 构】
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上海中医药大学附属普陀医院泌尿外科,上海200062
【出 处】
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中华中医药学会第十六次男科学术大会
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目的:观察不同剂量蟾毒灵(Bufalin)对人前列腺癌细胞株Du145体外生长细胞增殖的作用及其可能机制.方法:人前列腺癌DU145细胞用含10%胎牛血清、1%双抗(青霉素和链霉素)的RPMI 1640培养液建立稳定细胞系.实验分组:空白对照组、蟾毒灵剂量组(0.0001 μ mol/L),蟾毒灵剂量组(0.001 μ mol/L),蟾毒灵剂量组(0.01 μ mol/L),蟾毒灵剂量组(0.1 u mol/L).CCK-8法评价各剂量组Bufalin对前列腺癌细胞株Du145细胞体外生长的抑制作用:取对数生长期的Du145细胞制成5×104/ml单细胞悬液,接种于96孔板,每孔加入100μl,置37℃、5%C02培养箱中培养24h,每孔加入100ul不同浓度的蟾毒灵(Sigma公司)(0.0001、0.001、0.01、0.1 u mol/L)处理,另设不加药物的对照组.细胞加药处理24h/48h后,每孔加入CCK-8试剂,培养箱内继续培养2h,酶标仪测量450nm的波长下各孔吸光值(A).每次实验设3个复孔,重复3次.计算细胞增殖抑制率=[(对照组A值一实验组A值)/对照组A值]×100%.分别绘制两株细胞的增殖曲线流式细胞术测定各组细胞周期及凋亡率的变化:收集对数生长期的Du145细胞,按1×105个/ml的浓度,2rnl/孔接种于6孔培养板内,对照组不加药物,蟾毒灵组加入不同浓度蟾毒灵(0.001、0.01、0.1μmol/L)作用24h,收集细胞.按照细胞DNA含量(细胞周期)即时检测试剂盒说明书进行操作,利用流式细胞仪检测细胞周期.Western Blot法测定各组细胞凋亡过程中Caspase凋亡相关蛋白表达:收集对数生长期的Du145细胞,加入不同浓度蟾毒灵(0.001、0.01、0.1 u mol/L)作用24h,提取胞浆蛋白,使用Westernblot法检测caspase-3,9蛋白表达的表达.结果:蟾毒灵可以有效抑制前列腺癌Du145细胞生长,且随剂量加大,作用时间加长,效果增强.蟾毒灵可将细胞周期阻滞于G2/M期.Bufalin作用于Du145细胞通过上调Caspase-3和9的表达水平,其表达量呈剂量相关效应.结论:蟾毒灵对前列腺癌DU145细胞体外生长具有抑制作用,与剂量,时间相关.这为蟾毒灵治疗前列腺癌的临床应用提供了实验依据.其可能的机制与提高凋亡因子Caspase-3,9的表达有关.
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目录一、慢性前列腺炎诊疗现状二、慢性前列腺炎健康管理模式的构建一、慢性前列腺炎诊疗现状1.久治不愈2.焦虑、抑郁3.经济压力大4.缺乏自信和互信1.病因不明2.诊断困难3.无特效疗法4.易出现医疗纠纷二、慢性前列腺炎健康管理模式的构建健康教育管理诊断管理生活方式管理临床治疗管理康复管理2.1健康教育管理—慢性舫腺炎认知调查电台广播38.26%网络31.96%朋友13.48%;科普宣传13.04%;
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