【摘 要】
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本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrM ΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrM ΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrM ΔE基因和tPA信号肽序列,并分别将其克隆至pMD 19-T载体,经鉴定正确后亚克隆至真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-tPA-P
【机 构】
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四川农业大学 预防兽医研究所 猪病研究中心,四川 雅安 625014 四川农业大学 预防兽医研究所
【出 处】
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第四届人畜共患病学术研讨会、2014年中国狂犬病年会、中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会
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本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrM ΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrM ΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrM ΔE基因和tPA信号肽序列,并分别将其克隆至pMD 19-T载体,经鉴定正确后亚克隆至真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-tPA-PrM ΔE,对构建的重组质粒经鉴定正确后转染COS-7细胞,并利用间接免疫荧光试验检测质粒在细胞中的瞬时表达情况,同时利用制备的质粒免疫昆明小鼠,检测其JEV特异性血清IgG抗体水平、促脾淋巴细胞增长率,并以JEVCZ1株进行小鼠模型下的攻毒保护试验,进行DNA疫苗的攻毒保护率研究。
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目的 调查塔里木盆地南部和田地区民丰县黑热病流行状况.方法 告知同意后采血，检测黑热病抗体，美国西雅图InBio国际公司rk39免疫层析法试条手持检测条，加样端插入被检液中，液体开始爬行时立即从被检液中取出，吸液面朝上水平放置10min观察结果.出现2条紫红色线清晰可见为阳性(+)，位于加样端近的为反应线，远的为质控线，离样品端的紫红色线.rk39-ELISA夹心法检测黑热病抗体，初试筛选阳性标本
为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-Ⅰ)转移质粒pBS-TK-AMA1,并在真核细胞中表达,本试验以pBS-TK重组质粒为载体,插入犬新孢子虫AMA1基因.其中pBS-TK重组质粒是含有FHV-1TK基因的5(2000 bp)和3(1700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒的pBluesciptⅡ-SK(-)载体.通过转染试剂PEI将pBS-TK-A
附红细胞体病(Eperythrozoonsis)是由附红细胞体寄生于人和多种动物的红细胞表面、血浆及骨髓内引起的一种以贫血、黄疸、发热等为主要临床特征的人兽共患传染病.对于猪附红细胞体病暂时没有较好的手段控制,而且已知的功能性基因偏少.因此,本试验根据NCBI中公布的猪附红细胞体基因组序列,PCR扩增获得包括全基因在内1561 bp的吉林株膜蛋白OxaA基因序列,并上传NCBI(登录号：YP_00
[目的]调查广西壮族自治区南宁市市售蛇、蛙体内裂头蚴的感染情况。[方法]2011年11月至2012年10月期间于南宁各农贸市场购买634只蛙，主要为泽蛙629只、其他蛙类15只；152条蛇，主要为眼镜蛇42条、滑鼠蛇107条，其他蛇类3条，逐只(条)运用蠕虫学完全剖检术检查裂头蚴感染情况，随机取一次收集的裂头蚴感染实验动物猫，待裂头蚴发育至成虫阶段后，对成虫的形态学特征进行观察以鉴定。
全世界已经发现130余种虫媒病毒,可以人畜动物发热、出血热、脑炎等严重疾病,是全世界关注的公共卫生问题.此前研究显示我国存在乙脑、登革热、蜱传脑炎和新疆出血热4种虫媒病毒病及相关疾病,但是我国地域辽阔,地理景观复杂,媒介昆虫种类繁多,适宜多种虫媒病毒存在,我国是否还存在其他虫媒病毒?病毒的地理分布?传播媒介及其与疾病关系等一直未见系统研究.
云南省西部边境地区属南亚热带气候,适宜蚊虫和蚊传虫媒病毒的存在.该地区为我国连接东南亚和南亚地区的重要通道,境内外人员和物资交流频繁,虫媒病毒可以通过多种方式相互传播并引起流行,是该地区重要公共卫生问题.为评估蚊虫及蚊媒病毒对公共卫生的影响,我们首次对蚊虫种类及其密度与自然环境以及蚊虫媒介与虫媒病毒全年变化进行综合性研究.
乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)属于黄病毒科黄病毒属,是一种危害严重的人兽共患病病原,具有重要的公共卫生学意义.全球平均每年人的乙型脑炎(乙脑)发病约5万例,死亡1.5万人,57-68％的治愈者留有神经学后遗症.我国是乙脑的高发区,曾一度占世界发病人数的80％.同时,乙脑也是危害我国养猪业的重大疫病之一,主要引起妊娠母猪发生流产、产死胎或木乃伊胎,公猪
流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)简称乙脑,是由于蚊虫叮咬引起的人类严重中枢神经系统急性传染病,其病原体为流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV).我国于1951年将乙脑纳入传染病报告系统,属于法定报告乙类传染病.2008年,乙脑纳入我国计划免疫后,乙脑报告病例显著下降,但每年仍有3千例左右,报告的乙脑病例仍以临床诊断病例
日本脑炎病毒(JEV)是一种重要的人兽共患传染病病原,我国流行的日本脑炎病毒基因型为基因Ⅰ型和基因Ⅲ型。本研究为建立一种简单、快捷的鉴别JEV基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的方法,通过对Genebank中登录的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV核酸序列的比对分析,分别确定了基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV基因型特异性序列,分别设计合成了针对基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV的RT-PCR引物P1/P3和P2/P3,以JEV SA14-1
为掌握云南省蚊媒病毒分布状况,用诱蚊灯采集蚊虫标本,用金黄地鼠肾细胞(Goldenhamster kidney cell,简称BHK-21)培养法分离病毒,对阳性分离物进行分子生物学鉴定.2010年8月在云南省德宏州芒市和瑞丽市采集到蚊虫17种2 149只,其中三带喙库蚊(Culextritaeniorhynchus)1699只,构成比为79.06％;中华按蚊(Anopheles sinensis