【摘 要】
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目的:用不同保护剂、降温方法降温,并液氮中保存入骨髓细胞,观察20年后细胞相关存活指标,揭示细胞长期保存的规律。方法:人骨髓细胞以DMSO-AuP(10%二甲基亚砜-10%自体血浆)或DMSO—HES-HuA(5%DMSO-6%羟乙基淀粉.4%人血白蛋白)为保护剂,采用自控程序降温仪或超低温冰箱降温的低速降温,液氮液相中保存20年后,40℃复温,检测细胞相关存活指标。结果:骨髓细胞保存20年后干细
【机 构】
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海军总医院血液科,北京,100048
【出 处】
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第六届全国低温生物医学及器械学术大会
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目的:用不同保护剂、降温方法降温,并液氮中保存入骨髓细胞,观察20年后细胞相关存活指标,揭示细胞长期保存的规律。
方法:人骨髓细胞以DMSO-AuP(10%二甲基亚砜-10%自体血浆)或DMSO—HES-HuA(5%DMSO-6%羟乙基淀粉.4%人血白蛋白)为保护剂,采用自控程序降温仪或超低温冰箱降温的低速降温,液氮液相中保存20年后,40℃复温,检测细胞相关存活指标。
结果:骨髓细胞保存20年后干细胞回收率良好,体现在粒单系造祖血细胞(CFu-GM)、长期培养起始细胞(LTC-IC)回收率大于40%,间充质干细胞(MSCs)维持着原有生长特性。保护剂DMSO-HES-HuA优于DMSO-AuP,体现在标本复温后成熟红细胞破坏少、形态完整、渗透性脆性不变,血小板、CFU-GM、LTC—IC回收率高,MSCs生长与扩增好。降温手段用自控程序降温仪降温或超低温冰箱降温均可。
结论:DMSO-HES—HuA保护剂的超低温冰箱降温液氮中保存是骨髓干细胞长期保存的方便、可靠方法。
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