本研究以香菇的菌丝体为转化受体,建立了稳定高效的农杆菌介导的遗传转化体系。首先用香菇内源的3’-磷酸甘油醛脱氢酶基因(gpd)的启动子替换CaMV35S启动子驱动潮霉素基因,对pCAMBIA1301进行载体重组改造,将重组前后的双元转化载体分别进行转化效率的比较,结果表明引入gpd启动子后可以将转化效率提高一倍以上。然后,分别对转化过程中农杆菌的侵染时间、共培养温度和时间等3个方面进行遗传转化条件的优化,结果表明,农杆菌侵染20 min后,在25℃的条件下共培养3 d后用潮霉素进行筛选,筛选到转化子的效率最高可以达到30%。PCR扩增验证为阳性的转化子在无选择压力的固体培养基上连续继代培养5轮后仍能检测到潮霉素基因的存在,说明潮霉素基因在转化子在有丝分裂过程中可以稳定遗传。本研究建立的遗传转化体系以菌丝体为受体材料,为香菇功能基因组研究提供了一个快捷、稳定的技术平台。