【摘 要】
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本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列,选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因,依此进行PCR扩增,利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组,克隆到
【机 构】
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中国农业科学院特产研究所 吉林132109
【出 处】
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首届中国鹿业发展大会暨中国畜牧业协会鹿业分会成立大会
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本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列,选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因,依此进行PCR扩增,利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组,克隆到已经构建好的表达载体上,经过PCR检测,限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,得到了正确的重组,并构建了PME290-SDL0mp高效表达载体,将构建好的表达载体转化绿脓杆菌(PAK/2pfs),通过培养得到了表达产物,对表达产物进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定,结果符合预期.用分子生物学软件DNASTAR7.1对重组蛋白进行了分析,结果显示该基因编码的蛋白具有很好的亲水性.经融合蛋白动物免疫试验,结果表明该重组载体表达的L7-OMP31融合蛋白具有很好的免疫原性.本项研究为进一步开展布氏杆菌亚单位疫苗的研制奠定了基础.
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