【摘 要】
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目的：探讨Decorin对TGFFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响；观察Deeorin对TGFβ1诱导的HK-2细胞I、Ⅲ型胶原表达的影响。方法：将体外培养的HK-2细胞分为6组：A.阴性对照组；B.10ng/ml TGFβ1组：C.10ne/mlDecorin组；D.100ng/ml Decorin组；E.10ng/ml TGFβ1+10ng/mlDecodn组；F.10n
【机 构】
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南京医科大学附属南京市儿童医院 210008 南京医科大学儿科医学研究所 210029
【出 处】
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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会
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目的：探讨Decorin对TGFFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响；观察Deeorin对TGFβ1诱导的HK-2细胞I、Ⅲ型胶原表达的影响。
方法：将体外培养的HK-2细胞分为6组：A.阴性对照组；B.10ng/ml TGFβ1组：C.10ne/mlDecorin组；D.100ng/ml Decorin组；E.10ng/ml TGFβ1+10ng/mlDecodn组；F.10ng/mlTGFβ1+100ng/ml Decorin组。培养48h后，倒置显微镜下观察各组细胞的形态学变化。应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)检测HK-2细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)、波形蛋白、角蛋白、I、Ⅲ型胶原mRNA水平的表达；应用蛋白印迹技术(western-blot)和细胞免疫组化方法观察不同浓度的Decorin对HK-2细胞I、Ⅲ型胶原蛋白水平表达变化的影响。
结果：(1)A组、C组和D组细胞形态无明显变化，大部分细胞仍为椭圆形；A、C、D三组中，α-SMA、波形蛋白、角蛋白mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。B组HK-2细胞形态发生明显变化，大部分细胞拉长呈梭形，波形蛋白、α-SMA mRNA表达明显提高，角蛋白mRNA表达减少，与A组相比较有显著性差异(P<0.05)。E组和F组，梭形样细胞明显减少，尤其是F组梭形样细胞减少更明显，波形蛋白、α-SMA mRNA表达有所下降，角蛋白mRNA表达呈上升趋势，与B组相比较有显著性差异(P<0.05)，其中E组和F组两组间亦有显著性差异(P<0.05)。(2)B组与A相比较，HK-2细胞I、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白质的表达量明显增多；加入不同浓度的Decorin后，I、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白质的表达与单独TGFβ1组相比有不同程度的减少，且E组和F组相比较，两组间差异显著(P<0.05)。
结论：(1)TGFβ1能明显诱导人肾小管上皮细胞发生转分化；Decorin对TGFβ1诱导的人肾小管上皮细胞转分化具有抑制作用。(2)TGFβ1能促进人肾小管上皮细胞合成I、Ⅲ型胶原。(3)Decorin能抑制TGFI-1刺激引起的人肾小管上皮I、Ⅲ型胶原合成增加。
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