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【目的】百草枯中毒(PQ)导致的肺纤维化是百草枯中毒患者主要死亡原因之一,但是其发病机制尚不清楚。本研究目的是探讨HIF-1α及microRNA-210(miR-210)在百草枯中毒所致的早期肺纤维化中的作用。【材料和方法】66只雄性SD大鼠随机分为对照组和染毒组。染毒组以50mg/kg剂量百草枯一次性灌胃,并分不同观察时段(2h、6h、12h、24h、48h和72h)。体外培养人肺腺癌细胞A549和大鼠肺泡上皮细胞RLE-6TN,分为试剂对照DMSO组及染毒组(百草枯终浓度分别为800uM和160uM),通过Lipofectamine 2000转染HIF-1αsiRNA、miR-210模拟物或miR-210特异性抑制剂48h或72h。动物标本及细胞收集后行qPCR、Western blot及免疫组化等检测。【结果】动物模型染毒后2h,肺组织切片可见HIF-1α表达,Western blot观察HIF-1α、α-SMA蛋白在中毒后2h增高,ZO-1中毒12h后表达减少,HIF-1α及miR-210分别于染毒后12h及6h表达增加。体外转染HIF-1αsiRNA快速沉默HIF-1α48h后miR-210表达降低,细胞EMT进程减轻。DMSO组,A549细胞过表达miR-210 72h后HIF-1α和α-SMA表达升高,而RLE-6TN细胞过表达miR-210 48h即有HIF-1α表达升高;PQ组,RLE-6TN细胞内过表达miR-210后HIF-1α表达升高,且EMT程度增加,抑制miR-210表达后,PQ组HIF-1α表达降低,EMT程度减低;A549细胞内过表达miR-210后HIF-1α和细胞表型无明显变化,抑制miR-210 48h后HIF-1α表达即有明显下降,72h后ZO-1表达明显升高,EMT、程度部分减轻。【结论】(1)百草枯中毒后早期,肺泡上皮细胞表型即开始转变为间质细胞表型,提示EMT可能参与了百草枯诱导的早期肺纤维化的进程。(2)体外抑制HIF-1α表达后,百草枯所致肺上皮细胞EMT程度减轻,证实HIF-1α在PQ中毒中起到促纤维化作用,因此,HIF-1α可能成为治疗PQ诱导的EMT的潜在靶点。(3)抑制miR-210减轻百草枯诱导的EMT的程度,但其影响是否通过miR-210与HIF-1α之间的调节及其具体下游作用机制有待进一步阐明。(4)百草枯中毒中miR-210表达的升高依赖于HIF-1α活性,同时,miR-210与HIF-1α之间并非单一线性关系,miR-210对HIF-1α存在调节的作用。同时,提示针对肺纤维化的靶向治疗可能并不能单纯阻断其中之一,为临床新药研发提供新思路。