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由玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)引起的玉米大斑病是玉米生产上的重要病害,遍布世界所有玉米产区.2012年,受布拉万台风影响,我国东北地区潮湿多雨,导致大斑病大范围发生,为害程度3～5级,严重地块达9级.研究玉米大斑病菌的致病机理对于综合防治玉米大斑病具有积极意义.研究发现,玉米大斑病菌普遍存在三类信号转导途径,cAMP、Ca2+和MAPK途径,这些信号途径与病菌的分生孢子产生、病菌侵入、附着胞形成及发育、细胞壁形态建成、胁迫反应等过程关联,另外,黑色素的产生与病菌侵染效能密切相关.研究各途径中基因表达蛋白的关联性,对于全面揭示病菌致病机理和调控信号转导网络具有重要意义.目前,酵母双杂交系统是一种研究基因表达蛋白间相互作用的有效手段,利用该技术的重要前提是建立酵母双杂交cDNA文库.本研究以玉米大斑病菌为试验材料,提取幼嫩菌丝的总RNA,利用同源重组原理和SMART cDNA Libraryconstruction kit,Random Primer和oligo (dT)引物反转录合成第一链cDNA,构建酵母双杂cDNA文库(R文库、D文库),并分析文库质量.结果显示,R文库的克隆数为2.61×106/3μg pGADT7-Rec,D文库为2.54×106/3μg pGADT7-Rec；重组率分别为98.7％和95.8％,滴度分别为2.35×lOscfu/ml和1.42×108cfu/ml；插入cDNA片段的长度在0.2～2kb.说明本研究所构建的目的cDNA文库是一个高质量的文库,可以直接应用于后续的酵母双杂交筛选实验.本研究首次应用BD SMART技术成功构建玉米大斑病菌酵母双杂交cDNA文库,为从分子水平上深入了解玉米大斑病菌基因互作网络奠定基础.