【摘 要】
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研究背景:自身免疫调节因子（Autoimmune regulator,Aire）是一种转录因子。Aire基因的缺失或突变将导致由自身免疫应答介导的、以多器官损伤为特征的自身免疫性多腺体综合症,临床表现包括1型糖尿病等。近年来,研究发现了一类新的CD4+T细胞亚群,表型为CXCR5+ICOS+,因定居于淋巴滤泡而将其命名为滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells,TFH）
【出 处】
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第十三届全国免疫学学术大会摘要汇编
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研究背景:自身免疫调节因子（Autoimmune regulator,Aire）是一种转录因子。Aire基因的缺失或突变将导致由自身免疫应答介导的、以多器官损伤为特征的自身免疫性多腺体综合症,临床表现包括1型糖尿病等。近年来,研究发现了一类新的CD4+T细胞亚群,表型为CXCR5+ICOS+,因定居于淋巴滤泡而将其命名为滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells,TFH）。有研究发现,TFH水平的异常与自身免疫病的发病密切相关。前期实验发现Aire敲除鼠脾脏中TFH明显增多,在脾脏等外周组织中Aire主要表达在树突状细胞（Dendritic cells,DC）上,另有研究发现DC表达的共刺激分子ICOSL、分泌细胞因子IL-6和IL-27与T细胞上相应受体相互作用,参与诱导CD4+T细胞向TFH分化。因此,我们推测Aire是否影响TFH的分化,并调控DC细胞中与TFH分化相关分子（ICOSL、IL-6、IL-27）的表达。目的 :本课题以小鼠树突状细胞系DC2.4细胞作为研究对象,探讨Aire是否通过调控DC2.4细胞中相关分子（ICOSL、IL-6、IL-27）的表达进而影响TFH的分化及其可能机制。为全面了解外周Aire的功能及意义提供实验依据,并为解释Aire基因突变或缺失引发自身免疫病提供可能的思路。方法 :1.以DC2.4、转染GFP的DC2.4 （C1-1-1）及转染Aire的DC2.4细胞（A1-1）为研究对象,通过免疫荧光、流式细胞术、RT-qPCR检测这三种细胞中Aire的表达水平;2.将C1-1-1和A1-1分别与初始CD4+T细胞进行共培养,通过流式细胞术检测各组中TFH的数量;3.通过RT-qPCR、ELISA检测C1-1-1和A1-1上ICOSL、IL-6、IL-27的表达量。结果 :1.C1-1-1和A1-1的转染效率均达90%左右,成功获得稳定转染Aire的DC2.4细胞株;2.与A1-1共培养的CD4+T中TFH的比例明显低于C1-1-1组;3.A1-1中ICOSL、IL-6、IL-27的表达量明显低于C1-1-1组。结论 :过表达Aire的DC2.4细胞可抑制TFH细胞分化,Aire可抑制DC2.4细胞中与TFH细胞分化相关分子ICOSL、IL-6、IL-27的表达。
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