【摘 要】
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本研究通过原核表达一系列含有预测EoV 3CL蛋白酶功能域和切割位点，N-端和C-端分别带有His和Flag蛋白标签的重组蛋白，利用Western blotting检测表达产物。实验结果首次证实
【机 构】
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武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室 武汉 430072
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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本研究通过原核表达一系列含有预测EoV 3CL蛋白酶功能域和切割位点，N-端和C-端分别带有His和Flag蛋白标签的重组蛋白，利用Western blotting检测表达产物。实验结果首次证实了EoV 3CL蛋白酶的顺式切割活性，并利用制备的EoV 3CL蛋白酶特异性多克隆抗体检测出蛋白酶分子量大小。并通过改变不同的反应温度、pH、金属离子以及添加不同特异性抑制物观察蛋白酶切割活性的变化，进一步研究EoV 3CL蛋白酶生化性质，寻找到EoV 3CL蛋白酶体外切割反应的最佳条件。
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