【摘 要】
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目的:探究生物节律性的紊乱或者PFKFB3 本身的生物节律性是否会影响癌症的发生和发展。方法:(1)将人舌癌细胞系SSC9 增殖培养并同步化后,分6 个时间点分别收集细胞,采用RT-PCR 的方法探索该细胞PFKFB3,CLOCK,Bmal1,Per1 以及Per2 的生物节律性;(2)采用基因测序的方法获得PFKFB3启动子全序列,并利用软件定位出启动子上所有E-boxes 的位置;利用质粒转染
【机 构】
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华中科技大学附属协和医院口腔医学中心,武汉430022
【出 处】
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中华口腔医学会全科口腔医学专业委员会第六次学术会议暨广东省口腔医学会全科口腔医学专委会2015年年会
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目的:探究生物节律性的紊乱或者PFKFB3 本身的生物节律性是否会影响癌症的发生和发展。方法:(1)将人舌癌细胞系SSC9 增殖培养并同步化后,分6 个时间点分别收集细胞,采用RT-PCR 的方法探索该细胞PFKFB3,CLOCK,Bmal1,Per1 以及Per2 的生物节律性;(2)采用基因测序的方法获得PFKFB3启动子全序列,并利用软件定位出启动子上所有E-boxes 的位置;利用质粒转染和荧光素酶报告检测技术证实CLOCK、Bmal1 及其复合物对PFKFB3 表达的调控机制,及在不同时间点下PFKFB3 的表达差异;(3)以SCC9 为细胞模型,以3PO 为PFKFB3 的靶向抑制剂,利用RT-PCR、细胞流式等技术,体外证实不同时间点下,3PO 抑制PFKFB3 表达的能力是否有所差异。
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