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目的 研究蟾蜍灵对胶质瘤干细胞的杀伤作用,并探究蟾蜍灵对替莫唑胺(TMZ)敏感性的影响。方法 选取TMZ 相对不敏感的胶质瘤LN-229 细胞系,胰酶消化后,用含血清的完全培养基(MEM)悬浮细胞,1000r35min 离心,弃上清,用DMEM-F12 重悬,再离心一次,弃上清,用成球培养基重悬,细胞计数后铺于低粘附细胞培养板中,置于37℃,CO2 浓度5%的细胞培养箱中培养7 天,显微镜下观察细胞成球状态,并通过Western blot 检测干细胞特异性蛋白Nanog、Sox2 和Oct4 的表达。