【摘 要】
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目的:获得表达量高、抗原性强的基因工程重组抗原。检测不同地区的丁肝患者血清,初步验证其抗原性及在检测不同地区丁肝血清方面的差异。方法:从内蒙某丁肝患者血清中提取丁
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目的:获得表达量高、抗原性强的基因工程重组抗原。检测不同地区的丁肝患者血清,初步验证其抗原性及在检测不同地区丁肝血清方面的差异。方法:从内蒙某丁肝患者血清中提取丁肝病毒,经RT-PCR与PCR,使用PET43a表达质粒及HDV L-Ag 5和3端引入His标签获得丁型肝炎病毒L-Ag重组表达质粒,转化BL21(Rosetta)宿主菌,IPTG诱导表达。表达产物经饱和硫酸胺沉淀与亲和层析柱纯化后,采用EIA竞争法分析其抗原性。结果:经与ABBOTT Murexanti-Delta(total)试剂盒同步检测15份阳性和10份阴性血清,一致率100％。结论:EIA检测,证明具有良好的抗原性,基因工程表达的抗原蛋白在检测不同地区丁肝血清方面未见差异,故可用于丁肝的诊断及相关研究。
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